论文部分内容阅读
目的肝细胞可广泛用于细胞的毒理学、药理学等的研究,还可以对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的进入机制进行研究,同时也被国际上作为等待肝移植的“桥梁治疗”。从肝组织到肝细胞需要经过细胞的分离过程,在此过程中肝细胞的数目和活性受到多方面的影响。现对新西兰大白兔肝脏分别经肝动脉、门静脉、肝动脉和门静脉同时经过第一步灌注后,根据所得肝组织的微结构的观察和功能的测定,以期优选灌注方式,提高肝细胞的质量。方法健康新西兰大白兔24只,雌雄不限,根据实验设计分为三组(n=8):单独肝动脉灌注组(A组);单独门静脉灌注组(V组);肝动脉和门静脉同时灌注组(A+V组)。术前禁食禁水12小时,经耳缘静脉麻醉后,经腹正中线进腹,根据分组要求在体插管,取肝离体用HCA液进行灌注20min后,取灌注充分处肝组织测MDA、SOD值;分别从左肝外叶近肝门处和肝叶尖端处取肝组织,透射电镜下观察肝细胞的超微结构,并进行比较。结果⑴肝组织经灌注后的大体情况观察:经肝动脉灌注组及经门静脉和肝动脉同时灌注组,完成灌注后肝组织表面呈比较均匀的灰白色;经门静脉灌注组可见部分组织存在有局限的淤斑,灌注不彻底。⑵透射电镜观察:①对比三组不同灌注组的左肝外叶肝门部及叶尖部肝细胞电镜下微结构,肝动脉、门静脉同时灌注组及单独肝动脉灌注组的肝组织较正常,单独门静脉灌注的肝细胞微结构损伤较明显。⑶肝组织的SOD、MDA值检测:①超氧化物歧化酶(SOD)值检测:经检测比较,单独肝动脉灌注组和肝动脉、门静脉同时灌注组(P>0.05)无明显差异;单独肝动脉灌注组和单独门静脉灌注组(P>0.05)无明显差异;单独门静脉灌注组和肝动脉、门静脉同时灌注组有明显差异(P<0.05),肝动脉、门静脉同时灌注优于单独门静脉灌注。②丙二醛(MDA)值检测:经检测比较,单独肝动脉灌注组和肝动脉、门静脉同时灌注组(P>0.05)无明显差异;单独肝动脉灌注组和单独门静脉灌注组(P>0.05)无明显差异;单独肝静脉灌注组和肝动脉、门静脉同时灌注组有明显差异(P<0.05),肝动脉、门静脉同时灌注优于单独门静脉灌注。结论(1)采用HCA液进行等时重力灌注的情况下,肝动脉和门静脉同时灌注组肝脏组织结构和细胞功能较单独门静脉灌注组较好。(2)灌注对肝细胞有损伤作用,可能与氧化应激反应有关。