高抗小麦黄色花叶病毒转基因小麦的分子检测及其田间抗病性

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以获得农艺性状优良、丰产性好并高抗小麦黄花叶病毒(Wheat yellowr mosaic virus,WYMV)的转基因小麦新品种(系)为目标,在本实验室前期工作的基础上,对WYMV 72kDa蛋白基因和外壳蛋白(CP)基因以及来源于人的2-5A-RNase L基因在转基因小麦后代中的整合、表达和稳定遗传情况进行了分子检测,同时调查其对WYMV的抗性,并测定其农艺性状和丰产性。 PCR和PCR-Southern结果表明,转WYMV 72kDa蛋白基因小麦中的目的基因已经稳定地遗传到T<,7>代,并可以正常转录。田间抗病性调查结果,G7-4,G7-5和G8-1对WYMV的抗性达到了接近免疫的水平。通过NPTⅡ ELISA检测筛选,初步证实G7-5为不含抗性标记的转基因小麦新品系。产量测定结果,在病田种植G7-5品系,可减少产量损失10%~20%。 PCR和PCR-Southern以及NPTⅡ ELISA检测结果表明,转2-5A-RNase L基因小麦中的目的基因已经稳定遗传至T<,4>代,其中15个株系在田间表现对WYMV的高度抗性,并可能具有广谱抗病毒性。 田问抗病性筛选和PCR结果表明,WYMV cp的转基因小麦中的目的基因已经稳定地遗传到T<,7>代,其中H55对WYMV的抗性尤其突出,农艺性状和丰产性优良;目的基因在回交和杂交后代中的分离比例不符合孟德尔遗传规律。
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