论文部分内容阅读
查尔酮类化合物具有抗肿瘤、抗氧化等广泛的生物活性。以查尔酮为母核的结构修饰和活性研究一直是比较热门的研究领域。本论文以课题组前期合成的16个异戊烯基和香叶基取代的查尔酮衍生物为研究对象,通过构效关系研究筛选得到选择性和抗肿瘤活性最好的化合物1b,并深入研究了其抗肿瘤活性特点及作用机制。构效关系研究的结果显示:16个异戊烯基和香叶基取代的查尔酮类衍生物中,有6个化合物具有抗肿瘤活性好(IC50<5 μM)及对正常细胞毒性低的特点;其中化合物1b的选择性和抗肿瘤活性最好。MTT结果表明:化合物1b对10种人源的肿瘤细胞增殖有抑制作用,尤其对白血病K562细胞的生长抑制作用十分显著,其IC50为3.98 μM。本实验选择K562细胞深入研究了化合物1b抑制肿瘤细胞生长的作用机制。进行了化合物1b对K562生长抑制作用的初步机制研究。细胞形态学结果和流式细胞仪检测的结果显示:化合物1b对K562细胞的细胞周期基本没有影响,却能够显著诱导K562细胞凋亡。此外,化合物1b处理一定时间能诱导K562细胞线粒体膜电位由94.6%下降到61.9%,而内质网通路抑制剂4-PBA以及死亡受体通路激活剂TNF-α对化合物1b诱导的凋亡作用并未产生明显影响,证明了化合物1b诱导线粒体通路介导的K562细胞凋亡。对化合物1b引发K562细胞凋亡的相关蛋白caspase-3、PARP、Bcl-2、Bcl-xl、Bax等的表达变化进行检测,结果显示随着化合物1b浓度的增大,出现了 caspase-3的活化及其底物PARP的切割;同时,促凋亡蛋白Bax表达量上调,而抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xl的表达量下调。综上,本论文阐明了化合物1b通过线粒体凋亡途径诱导K562细胞凋亡,从而抑制其细胞增殖。本论文的研究结果为今后的进一步研究查尔酮类化合物的抗肿瘤活性奠定了基础。