驯鹿作为世界易危动物,在中国仅分布于大兴安岭西北麓根河区域。本实验采用来自内蒙古自治区呼伦贝尔盟大兴安岭腹地的雌、雄驯鹿耳部组织作为实验材料,成功建立了成纤维细胞系并传代培养。对不同代次的4组驯鹿成纤维细胞进行形态学、冻存前和复苏后的存活率、贴壁率、生长曲线和染色体核型及G带等一系列生物学特性分析;为了检测驯鹿细胞活性影响因素提取不同代次的雌、雄驯鹿成纤维细胞RNA,利用实时定量PCR技术检测干细胞相关基因Oct4、Sox2、Nanog-like、细胞生长与分裂相关基因MYC、ERRFI1、ANAPC2、BCCIP、CUL1、CKS1B、CCNF、CDKNIA、MCM2、PCNA、RPA3、RAD51和细胞端粒酶活性基因TERT的表达量。实验结果显示,驯鹿耳部组织成纤维细胞呈梭形扁平状、细胞核居中,平均传代培养时间3～4天、且可稳定传代60次以上;细胞贴壁从6 h开始、12 h贴壁率达85%以上,结果表明本实验所建立的驯鹿成纤维细胞的遗传状态稳定。驯鹿成纤维细胞冻存后的存活率在65～85%之间,与冻存前相比明显下降（P<0.05）。通过绘制生长曲线发现,驯鹿成纤维细胞4个细胞系从D2～D5是快速增长期、D5～D6出现生长转折点,所有成纤维细胞生长曲线均呈典型的“S型”,最大增殖细胞数量为37.1×104个。驯鹿成纤维细胞系的核型检测结果显示,84～88%的核型为2n=70,包括34对常染色体和1对性染色体XY,G带分析结果也显示了条带稳定性和驯鹿品种特异性。对驯鹿成纤维细胞线粒体DNA的ATP6、COX2、ND4及D-loop控制区基因测序并利用17个物种的基因序列与驯鹿构建系统发育树,除D-loop控制区外,其他基因序列中驯鹿显示早于其他鹿科物种的系统进化特点。为了探讨驯鹿成纤维细胞传代活性高的原因,通过AP染色、干细胞关键基因、细胞生长关键基因检测和端粒酶活性检测,结果显示驯鹿成纤维细胞分裂活性与梅花鹿相比较高,但在本品种内存在性别差异。综上所述,本研究成功建立了驯鹿成纤维细胞系并稳定传代培养60代以上,确认驯鹿标准核型为2n=68+XY。通过对驯鹿成纤维细胞进行生物学特性分析,揭示了驯鹿细胞增殖快的特点,为驯鹿细胞遗传资源库的建立、驯鹿保护及研究提供了重要研究材料。