构树总黄酮对表皮细胞防护作用研究

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该研究的目的是构树叶中提取天然成分,并研究其对表皮细胞的防护作用.首先,收集构树叶和提取构树总黄酮(total flzvonoids of Broussonetiapapyrifera,TFBP).取粉碎的构树叶干粉1000g,75%乙醇冷浸提取24h,收集浸液,药渣再用乙醇抽提,混合浸取液,用石油醚除杂质后,上聚酰胺柱,先用蒸馏水洗脱至无色,再用2000m195%乙醇洗脱,洗脱液经65℃水浴浓缩得到褐黄色固体2.008g,定性鉴定<[5]>和黄酮类物质的一般性质相符.芦丁为标准品,分光光度法测定黄酮类物质的含量为7.91%.加标回收法测得平均回收率为99.53%,并通过抗油脂氧化反应实验初步判定提取物具有抗氧化性.其次,用波长为365nm,剂量1.38J/cm<2>的紫外线照射,观察细胞损伤现象:多数细胞的胞体萎缩、胞浆暗、细胞变小、变圆、角质化增强、细胞脱落.初步证实紫外线对表皮细胞有损伤作用.最后,通过酶消化表皮细胞,并分别给予不同剂量紫外线、铅、砷,不同剂量的构树总黄酮TFBP处理细胞,通过噻唑蓝(MTT)染色法检测细胞活性、细胞裂解液中MDA含量、SOD和GSH-Px活力变化,以判断构树总黄酮是否对表皮细胞有保护作用.综上所述,在该实验条件下,从构树叶中能够提取得到构树总黄酮,含量为0.273g/kg.大剂量的紫外线、铅、砷分别作用表皮细胞,可以使细胞的活性降低,对细胞有损害作用.当添加100~200mg/L的构树总黄酮TFBP后,细胞活性升高,MDA含量明显下降,SOD和GSH-Px活力增强.表明构树叶提取物能够增强细胞内抗氧化酶的活性,增强机体抗氧化能力,提高细胞的活性,对皮肤的衰老进程有延缓作用,具有作为有效成分添加到护肤品中的前景.
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