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本文以8只装有永久性瘤胃瘘管的绵羊为实验动物,采用实时荧光定量PCR(Real-timePCR)技术,研究日粮中添加椰子油对绵羊瘤胃微生物群落结构,产甲烷菌数量的影响;并结合Tunnel技术,对绵羊瘤胃甲烷产量进行了实时监测,从反刍动物营养学及分子生物学方面初步探讨了椰子油对瘤胃甲烷产量生成途径的调控机制。试验分为四组,分别为:T1(只饲喂燕麦干草为基础日粮)、T2(基础日粮为燕麦干草,补饲玉米精料,日粮粗精比为6:4)、T3(基础日粮为燕麦干草,补饲玉米精料,日粮粗精比为6:4,添加12g/d椰子油)、T4(基础日粮为燕麦干草,添加12g/d椰子油)。其中椰子油的添加量为12g/d。并获得以下主要研究结果:1.瘤胃瘘管是研究反刍动物消化功能、微生态环境和生理生化指标等常用的实验手段,因此经反复多次实践,设计了一种新型的绵羊瘤胃瘘管,尝试采用局部麻醉和传导麻醉相结合的方法,对四只绵羊进行了瘤胃瘘管手术,术后羊只均恢复良好、无感染、无瘤胃液的外漏情况出现。该瘤胃瘘管较传统瘘管有明显优势,值得推广。2.采用Real-time PCR技术定量技术对绵羊瘤胃液中瘤胃真菌(Ruminococcus Fungi)、黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)、瘤胃甲烷菌(Ruminococcus methanogen)、琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)数量进行实时定量监测,定量结果表明:在以燕麦干草(T1)为基础日粮下,添加精料(T2)和椰子油组(T3)产甲烷菌数量明显受到抑制,分别降低了61.8%和91.6%。实验中添加精料,绵羊黄色瘤胃球菌数量在添加精料后增加了了69.1%,而瘤胃厌氧真菌显著降低(P<0.01),与燕麦干草组(T1)相比降低了下降了98.8%,琥珀酸丝状杆菌则比T1 (oat)减少了98.5%,证实了椰子油对绵羊瘤胃发酵尤其是纤维素的降解具有一定负面效应。3.采用Tunnel方法对绵羊瘤胃甲烷监测表明,椰子油对绵羊甲烷排放具有明显的影响。其中在燕麦及精料中添加椰子油,甲烷产量下降了65.2%,而燕麦干草直接添加椰子油使绵羊瘤胃甲烷产量下降了75%,同甲烷菌的下降趋势趋同。研究椰子油对瘤胃发酵特性的影响,不同处理间,绵羊的瘤胃pH维持在6.45~7.15之间,适合瘤胃微生物生长,添加椰子油后瘤胃液NH3-N浓度明显降低,随着椰子油的添加,乙酸浓度有降低的趋势,而丙酸浓度则有上升的趋势,乙酸/丙酸与对照组相比显著降低(P>0.05)。