【摘 要】
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SnRK2(sucrose non-fermenting 1-related protein kinase 2)是一类植物中特有的丝氨酸/苏氨酸类蛋白激酶,参与植物体内多种信号转导,在应答无机环境(盐、干旱等)胁迫以及一
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SnRK2(sucrose non-fermenting 1-related protein kinase 2)是一类植物中特有的丝氨酸/苏氨酸类蛋白激酶,参与植物体内多种信号转导,在应答无机环境(盐、干旱等)胁迫以及一些基本的生理过程中起到非常重要的作用。本研究以拟南芥SnRK2成员AtSnRK2.4为研究对象,我们以AtSnRK2.4为“诱饵”蛋白通过酵母双杂交技术筛选与其有相互作用的蛋白,确定AtSnRK2.4与互作蛋白之间的相互作用关系,为探求其抗逆机理奠定基础。本研究中,构建了pGBKT7-AtSnRK2.表达载体。通过酵母双杂交技术筛选出AtSnRK2.4的互作蛋白为2-10。然后,利用体外Pull-down实验和体内的双分子荧光互补(BiFC)试验进一步证实了两个蛋白之间的相互作用关系。AtSnRK2.4蛋白具有自磷酸化作用。并且利用GFP荧光标记技术,检测到AtSnRK2.4和2-10蛋白定位在洋葱表皮细胞的胞质溶胶中。最后通过荧光定量PCR技术,对AtSnRK2.4和2-10基因的mRNA水平上的表达特性进行了研究。结果表明,AtSnRK2.4和2-10在转录水平上对NaCl、ABA、干旱胁迫产生不同程度的应答响应,说明AtSnRK2.4和2-10是与盐、ABA和干旱胁迫相关的应答基因。这为进一步探讨AtSnRK2.4参与植物逆境胁迫(盐、干旱等)应答的分子机制奠定了基础。
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