目的：探讨关节内出血对关节软骨产生的影响与病理变化过程，旨在对关节内出血给予及时合理的治疗。关节内出血在运动损伤中非常常见，经常造成关节内出血，关节软骨暂时处于一种血液浸润的环境。临床上往往予以保守治疗而另血液自行吸收，但是它将使关节发生骨关节炎的机率明显增加。本实验采用给实验动物兔膝关节内注入自体血的方法，模拟关节内出血的病理过程，观察短期关节内出血对在体关节软骨的影响，主要包括大体观察、普通光镜观察、水、蛋白多糖以及胶原含量的改变，以探讨关节软骨损害的机制及其各种成分变化与时间之间的关系，并分析其发生变化的可能原因。 方法：选取大耳白兔 36 只随机分为 2 组，每组 18 只。第 1 组：于第 1 天在右后膝关节内注入自体静脉血 4ml，左后膝关节作为空白对照。在第 3 天重复一次，剂量同第 1 天。第 2 组：每只动物的右后膝关节内注入自体血 4ml，左后膝关节 2ml，其余步骤与第 1 组完全相同，以观察不同出血量对关节软骨的影响。把第 1 组和第 2 组实验动物再各随机分为 3 组，每组 6 只，分别于 1 周、4 周、8 周取材。取材部位位于股骨内髁后部负重区的内缘与外缘中点，此点距内髁后缘 3mm，宽约 2mm。将标本置入含有 1%氯代十六烷基吡啶的 10%中性福尔马林溶液固定 48 小时，用于组织切片(保证用于 Safranin O 染色的切片为 2 张)。将股骨髁及胫骨平台 1<WP=4>中 文 摘 要锯下，置于密闭的操作箱内，切取关节软骨。一半用于含水率的测定，一半用于胶原含量的测定。然后做以下几项测定：(1)软骨含水率：软骨组织在含 P2O5 的真空条件下进行干燥。软骨含水率=(软骨湿重－软骨干重)/软骨湿重×100%。（2）蛋白多糖含量：按照 Shin-Chieh Hung 的方法，从软骨表面到潮线之间分为 3 个区域，表层、中间层和深层。将显微镜及其摄像系统连接于多功能彩色病理图像分析系统。调整并固定计算机分析系统亮度后捕获图像：每张 Safranin O 染色切片随机捕获 3 张图像，每一标本获得图像 6 张。每张切片的浅、中、深三层分别取 6、18、6 个部位进行实域分割，计算机自动计算每副图像每层的平均光密度值。将每一标本的 6 副图像按层次（浅、中、深）分别求出光密度值的平均值，其值即代表着软骨每层蛋白多糖的含量。(3)采用生化比色法测定软骨胶原内羟脯氨酸的含量。 结果：(1)大体观察：受出血影响，关节软骨色泽稍暗，表面粗糙。第 1 周最为明显。4ml 组重于 2ml 组。(2) HE 染色结果：实验侧软骨表面不光滑，细胞排列欠整齐，细胞分裂相增多，可见软骨细胞簇聚。潮线变模糊。4ml 侧比 2ml侧变化明显。(3) Ⅱ型胶原免疫组化染色：第 1 周，软骨表层染色稍变淡，软骨细胞周围浓染区染色无明显变化。第 4周以后未见明显变化。(4)含水率的改变: ⅰ) 与空白对照组比较：第 1 周及第 4 周含水率都显著增加(均为 P<0.05)。第8 周时与对照组无明显差异(P>.05)。第 4 周低于第 1 周(P<0.05)。第 8 周低于第 4 周(P<0.05)。 (ⅱ) 4ml 与 2ml 两实验组的比较：在第 1 周及第 4 周，4ml 组含水率显著大于 2ml组(均 P<0.05)，在第 8 周两组间无显著性差异(P>.05)。 关 (5) 2<WP=5>中 文 摘 要节软骨各层蛋白多糖含量的改变：(ⅰ)与对照组比较：浅层在第 1 周及第 4 周明显低于对照组(均 P<0.05)，第 8 周与对照组间无明显差异(P>.05)。第 4 周大于第 1 周(P<0.05)，8周大于第 4 周(P<0.05)。中间层在第 1 周低于对照组(P<0.05)，第 4、8 周与对照组相比均无显著性差异(均 P>.05)。第 4、8 周均大于第 1 周(P<0.05)，第 8 周与第 4 周间无显著差异(P>.05)。深层各组与对照组之间均无显著性差异(均P>0.05)。(ⅱ) 4ml 与 2ml 两实验组的比较：浅层在第 1、4周，4ml 组均低于 2ml 组(均为 P<0.05)。两组在第 8 周无显著性差异(P>.05)。中间层在第 1 周 4ml 组低于 2ml 组(P<0.05)，在第 4 周及第 8 周，两组无显著性差异(均 P<0.05)。深层在各个时间点上两组间均无显著性差异(P>.05)。(6) 胶原含量的改变: (ⅰ) 与对照组比较：在第 1 周胶原低于对照组(P<0.05)。第 4、8 周与对照组间均无明显差异(P>.05)。第 4、8 周均大于第 1 周(P<0.05)。(ⅱ) 4ml 与 2ml 两实验组的比较：4ml 组在第 1 周低于 2ml(P<0.05)。在第 4 周及第 8周两组间无显著性差异(P>.05)。 结论：(1)采用 Safranin O 染色，结合计算机图形技术可对关节软骨蛋白多糖含量进行半定量测量分析，并能进行分层测定。(2)关节内出血模型能很好的模拟运动损伤或其它情况下关节内出血的病理状态，并可观察不同剂量的血液对关节软骨的影响。(3)短期关节内出血对关节软骨造成一定程度、一段时间的损害：包括含水率的增加、蛋白多糖含量的减少、胶原含量的减少。蛋白多糖和含水量减少持续时间较长，其期限大约为 8 周。而只在出血后第 1 周胶原有可探测到的改变。表层改变最为明显，早期累