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间充质干细胞(MSC)是继造血干细胞之后近年研究较多的另一类组织干细胞。目前发现骨髓、脐带血、关节滑膜、胎儿血液和肝脏以及胎儿、成人、老年人骨骼肌和皮肤的结缔组织内均存在具有多向分化潜能的MSC。本论文主要研究了人骨髓和脐带血来源的MSC体外分离、扩增、定向诱导以及在动物体内的迁移和分化,为MSC的临床应用提供了理论依据和技术方法。
1.骨髓MSC是一类存在于骨髓中的具有多向分化潜能的干细胞,体外不仅可以分化为间充质类细胞,而且可以分化为非间充质类细胞。本研究探讨了人骨髓MSC的体外分离、扩增和向神经细胞的定向诱导分化条件。无菌条件下采集正常人的骨髓,用相对密度1.073g/mL的Percoll分离液分离骨髓中的单个核细胞,进而获得MSC。用MesenCult~(TM)培养基进行纯化和扩增培养。5.0×10~5个原代细胞体外扩增12代后获得2.3×10~9个细胞,扩增约4.6×10~4倍。流式细胞仪检测结果显示,骨髓MSC不表达CD34、CD11a,强表达CD29,弱表达CD71。