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目的：通过高糖高胰岛素培养诱导3T3-L1脂肪细胞株构建胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)模型,观察IR脂肪细胞miR-21表达量的变化及脂肪细胞miR-21表达增加对R的改善作用,并初步探讨其改善脂肪细胞胰岛素敏感性的部分机制。方法：(1)通过传统的鸡尾酒方法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化成熟脂肪细胞；(2)将成熟3T3-L1脂肪细胞分为正常糖低INS (NGLI)组、正常糖高INS (NGHI)组、高糖低INS (HGLI)组、高糖高INS(HGHI)组,应用氚标记的2-脱氧葡萄糖(2-3H-DG,2-DG)摄取试验检测脂肪细胞INS敏感性,通过高糖高胰岛素处理建立3T3-L1成熟脂肪细胞IR模型；(3)将IR脂肪细胞分为3组：IR组、转染含pmiR-21质粒转染组(pmiR-21)、转染空质粒转染组(pNC),并设立对照组(正常脂肪细胞),实时荧光定量RT-PCR技术检测各组脂肪细胞miR-21表达水平差异；(4)应用2-DG摄取试验检测以上各组脂肪细胞的INS敏感性；(5)Western blot技术检测各组脂肪细胞PTEN蛋白、Akt蛋白以及p-AktSer473蛋白水平的差异。结果：(1)3T3-L1前脂肪细胞分化成熟,诱导第10天油红O染色可见呈圆形或椭圆形,细胞浆内大量红色脂滴聚集的分化成熟的3T3-L1脂肪细胞；(2) NGHI组与NGLI组相比3T3-L1细胞INS刺激葡萄糖摄取无显著差异(P>0.05)。HGLI组的3T3-L1细胞INS刺激葡萄糖摄取与NGLI组相比减少(P<0.05)。HGHI组与NGHI组相较葡萄糖摄取减少(P<0.05)。HGHI组与NGLI组3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取率相比明显减少(P<0.01)；(3)IR组miR-21表达较对照组下降(P<0.05), pmiR-21组miR-21的表达与对照组相比,表达量无显著差异(P>0.05),pmiR-21组与IR组比较,miR-21表达量增加(P<0.05)。pNC组与对照组相比表达下降(P<0.05),与IR组比较表达量无显著差异(P>0.05)；(4)IR组与对照组比较,INS刺激葡萄糖摄取率减少(P<0.05)。pmiR-21组与对照组相比,INS刺激葡萄糖摄取率无显著差异(P>0.05),与IR组比较摄取增加(P<0.05)。 pNC组脂肪细胞与对照组比较INS刺激葡萄糖摄取率减少(P<0.05),与IR组相比无显著差异(P>0.05),与pmiR-21组相比较减少(P<0.05);(5)IR组3T3-L1脂肪细胞与对照组相比PTEN蛋白的表达量增加(P<0.05), p-AktSer473表达减少(P<0.05)。 pmiR-21组与对照组相比,PTEN及p-AktSer473表达均无显著差异(P>0.05),与IR组比较PTEN表达减少(P<0.05), p-AktScr473表达增加(P<0.05)。pNC组与对照组相比PTEN表达增加(P<0.05), p-AktSer473表达减少(P<0.05),与IR组比较PTEN及p-AktSer473表达无显著差异(P>0.05)。各组脂肪细胞的Akt表达无显著差异(P>0.05)。结论：(1)高糖高INS诱导3T3-L1脂肪细胞产生IR, miR-21表达减少,PTEN蛋白表达增加,p-AktSer473表达减少,Akt表达无明显改变；(2)转染pmiR-21使miR-21在IR的3T3-L1脂肪细胞表达增加,PTEN蛋白表达减少,AktSer473磷酸化增加,Akt表达无明显改变,细胞INS敏感性增加；(3)miR-21可能通过负向调节PTEN蛋白的表达,使AktSer473的磷酸化增加,从而起到改善IR的作用。