早期断奶应激及日粮亮氨酸水平影响仔猪骨骼肌重要代谢相关信号通路规律的研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ydfang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
骨骼肌在动物体内分布广泛,是主要的代谢组织之一,对骨骼肌的代谢调控是动物在不同的生理条件下实现自我调控的关键。仔猪的早期断奶引起的早期断奶应激及其营养调控都是影响现代养猪生产效益的关键因素,且仔猪的早期断奶应激改变骨骼肌的蛋白质代谢及日粮亮氨酸调节仔猪骨骼肌能量代谢的机制尚不清楚。比较蛋白质组学技术对蛋白质组高通量、高效率的筛选与定量,可为从整体水平解析早期断奶应激及亮氨酸对仔猪骨骼肌重要代谢相关信号通路的影响规律提供技术支持。因此,本研究进行了如下试验:试验一利用iTRAQ技术分别对0h(对照组)和24h(处理组)断奶处理后仔猪的骨骼肌样品进行差异显著蛋白质的筛选与定量,并进行后续的生物信息学分析与验证,得出如下结果:1.利用iTRAQ技术成功筛选到44个受早期断奶应激影响的仔猪骨骼肌差异显著蛋白质,同时利用IPA软件及GO、KEGG数据库成功绘制出这些差异显著蛋白质的蛋白互作网络。2.早期断奶应激抑制仔猪骨骼肌中蛋白质的合成,通路分析的结果显示蛋白质合成相关的EIF2和mTOR信号通路受到抑制;而免疫印迹分析表明RPL17、RPS4X和p-mTOR/mTOR都显著性下调(P<0.05),表明仔猪骨骼肌蛋白质的合成受到抑制。3.早期断奶应激促进仔猪骨骼肌自噬的发生,在处理组中,LC3-II/β-tubulin呈显著性上调(P<0.01),同时透射电镜检测发现自噬泡的数量显著增多(P<0.01),表明早期断奶应激上调仔猪骨骼肌自噬水平;而PRKAR1A、核内定位的p-CREB以及自噬起始的多个关键基因ATG5、ATG12和CAPNS1的显著性上调表达,表明早期断奶应激刺激仔猪骨骼肌中自噬水平的上调可能是通过PKA/CREB信号通路。试验二断奶仔猪分别饲喂含1.66%(NL组)和2.1%(HL组)亮氨酸的日粮,利用iTRAQ技术分别对NL组和HL组断奶仔猪骨骼肌样品进行差异显著蛋白质的筛选与定量,并进行后续的生物信息学分析和验证,得出如下结果:1.利用iTRAQ共计筛选到有157个受亮氨酸影响差异显著蛋白质,后续的生物信息分析表明亮氨酸改变断奶仔猪骨骼肌中的能量代谢,HL组断奶仔猪骨骼肌中SDHB、ATP5F1、ACADM和HADHB都显著性下调表达(P<0.01,除ATP5F1,P<0.05),而PKM显著性上调(P<0.05),同时ATP含量显著下降(P<0.05),表明亮氨酸抑制仔猪骨骼肌中的氧化磷酸化和脂肪酸的β-氧化,促进糖酵解。2.亮氨酸促进断奶仔猪骨骼肌中蛋白质的合成,促进p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K以及RPS4X的显著性上调表达(P<0.05)。3.亮氨酸改变仔猪骨骼肌肌纤维的组成,与NL组相比,HL组中慢收缩肌纤维特异性蛋白TNNI1显著下调(P<0.01),快收缩肌纤维特异性蛋白TNNI2显著上调(P<0.01),同时MyHC-I,MyHC-IIa和MyHC-IIx呈现的显著下调(P<0.05),MyHC-IIb的显著上调(P<0.05),表明亮氨酸促进断奶仔猪骨骼肌中慢收缩肌纤维向快收缩肌纤维的转化。
其他文献
目的:探讨糖尿病诊断过程中生化检验的实际应用效果.方法:在医院2015年7月到2016年9月期间诊治的糖尿病患者中抽取100例作研究组样本,同期取100例健康体检人群作为对照组样本
目的:探究完整结肠系膜切除应用在结肠癌手术治疗中的临床疗效.方法:研究对象在我院2013年3月-2016年3月接收的结肠癌患者随机抽取65例,根据所治疗方式不同将患者分为对照组
目的:探讨盐酸氨溴索在老年肺炎治疗中的应用价值.方法:选取我院于2016年2月到2017年5月收治的80例老年肺炎患者,随机将其分为两组,即参照组(n=40)和观察组(n=40),两组患者入
目的:探讨无创正压通气对肺源性呼吸困难的尘肺病患者的疗效.方法:收集2012年1月到2016年12月我院收治的肺源性呼吸困难的尘肺患者100例,按照随机数字表法分为观察组和对照组
目的:探讨手足口病的特点及诊治效果.方法:对我院2014年1月-2016年12月期间收治的手足口病患儿40例临床发病情况临床特点及治疗方法进行分析.结果:手足口病临床表现以发热、
目的:探讨地屈孕酮在先兆流产患者治疗中的应用效果及安全性.方法:将2016年9月-2017年3月于我院就诊的96例妇产科先兆流产患者随机分成对照组和观察组,观察组采用地屈孕酮治