基于电穿孔技术的肝癌细胞表面增强拉曼光谱检测

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本文介绍了表面增强拉曼光谱(SERS)在肝癌细胞检测中的应用。通过利用电穿孔技术分别将银和金纳米粒子快速导入活细胞内作为SERS增强基底以获得单细胞SERS光谱,进而对细胞内部生化分子进行研究。本文的主要研究内容如下:1、分别利用电穿孔技术和孵育内吞法将银纳米粒子导入活肝癌细胞作为SERS增强基底,两组实验都得到了重复性较好的平均全细胞SERS光谱(n=15),但平均SERS光谱差异性很大,可能是由于银纳米粒子对细胞产生的毒性作用引起了细胞内生化成分的改变。2、利用电穿孔技术将金纳米粒子快速导入肝癌细胞内,获得了单个活细胞的平均全细胞SERS光谱(n=15)。细胞的透射电镜图证实金纳米粒子不但被成功导入细胞内,还形成了大约300nm大小的纳米粒子聚集物,实验结果显示这种纳米粒子聚集物在细胞SERS检测中显示出了很好的SERS增强效果,可以与24h的孵育内吞方法相比拟。3、在金纳米粒子为SERS增强基底的实验中,通过比较电穿孔组和孵育组(24h)的平均全细胞SERS光谱,发现两种方法得到的拉曼光谱极其相似。有意思的是,金纳米粒子和细胞孵育很长时间后(24h),细胞仍然在生长和分裂。本文的实验结果表明,利用金纳米粒子结合电穿孔-SERS光谱技术来检测活细胞具有毒性小、方便、分辨率高快捷等优点,在实现癌症的早期诊断方面具有潜在的应用价值。
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