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目的:运用网络药理学分析方法,挖掘补肾益智方干预MCI可能的靶点和通路,通过动物实验进行验证,探讨补肾益智方干预MCI的作用和机制。方法:(1)网络药理学:利用中药系统药理学分析平台(TCMSP)筛选补肾益智方的活性成分和作用靶点。运用TCMSP和TTD数据库筛选AD相关治疗靶点。通过Cytoscape软件,构建补肾益智方-AD靶点作用网络,预测补肾益智方治疗AD的潜在靶点,构建靶点蛋白相互作用网络,进行拓扑结构分析。运用David 6.8数据库对核心靶点进行GO富集分析和KEGG通路富集分析。(2)动物实验:采用12周龄的APP/PS1小鼠作为模型,同窝同龄C57BL/6J野生型小鼠为空白对照,补肾益智方干预12周后,通过Morris水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力;刚果红染色观察淀粉样沉积情况;镀银染色观察神经纤维缠结情况;ACHE、ChAT试剂盒检测ACHE、ChAT的活力;Elisa法检测Aβ42、P-Tau的含量;免疫组化法检测小鼠海马P-Tau的表达;Western Blot法检测PI3K/Akt/GSK3β信号通路相关蛋白的表达。结果:(1)网络药理学研究筛选出101个活性成分,40个潜在靶点。GO富集分析共得出38个条目,分子功能6条,生物过程21条,细胞组成11条,KEGG富集分析得到11条潜在信号通路,主要涉及突触功能和Tau蛋白磷酸化途径。(2)动物实验表明补肾益智方能够改善MCI小鼠的空间学习记忆能力,减少小鼠海马组织内老年斑沉积和神经纤维缠结,增加乙酰胆碱含量,降低外周血内Aβ42和P-Tau的含量。同时,补肾益智方能通过PI3K/Akt/GSK3β信号通路起作用,增加PI3K和Akt的磷酸化,降低GSK3β的磷酸化,从而抑制Tau蛋白磷酸化。结论:补肾益智方能改善MCI相关指标,并通过PI3K/Akt/GSK3β信号通路减少Tau蛋白磷酸化,从而改善MCI的学习记忆功能。