山楂有理气通脉、活血化瘀、化浊降脂的功效,具有良好的降血糖、降血脂及保护心血管的作用价值。课题组前期研究发现山楂叶黄酮提取物和山楂果有机酸提取物可以通过腺苷磷酸活化蛋白激酶α（AMP-activated protein kinaseα,AMPKα）通路调节Ⅱ型糖尿病大鼠脂代谢紊乱;采用系统分离的方法从山楂叶中提取分离得到了32个单体成分。本文探究了山楂叶提取物调节Ⅱ型糖尿病大鼠糖代谢紊乱的作用机制,采用体内外模型多水平评价了山楂叶不同提取物的活性,对分离获得的不同类型的山楂叶单体成分对比研究了调节糖脂代谢紊乱的活性及量效关系研究。1.以高脂高糖饲料联合链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,给予山楂叶、果提取物进行治疗给药。采用Western Blotting法检测肝脏信号传导与转录激活因子3（Signal Transducer and Activator of Transcription 3,STAT3）、p-STAT3、蛋白激酶B（AKT1）、p-AKT1、糖原合成酶激酶-3β（Glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β）、p-GSK-3β蛋白的表达量。结果发现,山楂叶总黄酮和山楂果总有机酸可以下调STAT3蛋白磷酸化水平,上调AKT1和GSK-3β蛋白磷酸化水平,促进糖原的合成,提示山楂叶提取物可以通过STAT3/AKT1/GSK-3β信号通路调节T2DM大鼠糖代谢紊乱状态。2.山楂叶70%乙醇提取液浓缩后经树脂吸附,分别使用25%、50%、85%乙醇洗脱,对洗脱部位进行乙酸乙酯、正丁醇萃取等方法分别获得不同提取物M33～M41,并采用UPLC-PDA/MS/ELSD进行成分分析。M33、M34、M35、M36主要含黄酮苷类化合物,M37、M38主要含有三萜类化合物。M 39主要含有水溶性多糖,M40含有黄酮类化合物、多糖以及少部分萜类化合物。M41主要含黄酮苷类成分为主。以0.5%的蛋黄溶液饲养斑马鱼48 h建立高脂血症斑马鱼模型,分别给予不同山楂叶提取物,饲养24 h后,检测斑马鱼尾部血管脂肪含量,计算降脂率。结果发现,山楂叶各提取物均可以降低高脂血症斑马鱼的血脂。M37、M38、M41降低高脂血症斑马鱼脂质的效果较好。3.以0.5 m M油酸和棕榈酸配制的混合脂肪酸（FFA）诱导Hep G 2细胞24 h建立脂肪堆积细胞模型,给予32个单体化合物A1～A32,检测细胞内TG含量。结果发现,A1、A2、A5、A19、A32降低细胞内TG含量活性较好。在0.001～10μM浓度范围内,化合物A1、A19、A32干预的Hep G 2细胞内TG含量呈剂量依赖性降低。A1和A32剂量依赖性降低TC含量。采用不同提取物M33～M41干预脂肪堆积细胞后,检测细胞内脂质含量和TG含量,结果发现,0.4～40μg/m L,M34、M36、M37、M39、M40干预的细胞内脂质含量呈量效关系。40μg/m L的M33、M36、M37、M39显著降低TG含量,各浓度M35和M40均可降低TG含量,但无量效关系。4.以35 m M的葡萄糖联合100 n M胰岛素诱导Hep G 2细胞24 h建立IR-Hep G 2细胞模型,造模成功后分别给予32个单体化合物干预24 h,检测细胞培养液内葡萄糖含量,计算葡萄糖消耗率,选出活性好的化合物A10、A13、A25、A26、A29、A30、A32。0.001～1μM A10、A29、A32可以剂量依赖性的增加葡萄糖消耗。A10、A13、A25、A29呈剂量依赖性促进细胞内糖原合成。在此模型上评价各山楂提取物的活性,结果发现,0.4～40μg/m L浓度范围内,M35、M39、M40、M41呈剂量依赖性增加葡萄糖消耗量;M33、M34、M38呈剂量依赖性增加糖原合成。结论:山楂叶和山楂果提取物可以通过激活STAT3/AKT/GSK-3β通路调节Ⅱ型糖尿病大鼠糖代谢紊乱。体外活性评价中,三萜类化合物A19和A32降低TG活性较好,黄酮类成分A1降低TC含量活性较好。黄酮类化合物A10和萜类成分A29增加葡萄糖消耗的活性较好,萜类成分A25、A29促进糖原合成的活性好。黄酮类成分M40降脂活性较好。三萜类成分M38促进葡萄糖消耗量活性较好。黄酮类成分M41促进糖原合成活性较好。