论文部分内容阅读
舞毒蛾(Lymantria dispar L.)是一种分布广、寄主种类多、危害大的食叶性害虫,给林业经济和生态建设造成极大损失。舞毒蛾核型多角体病毒(Lymanria dispar nucleopolyhedrosivirus,Ld NPV)是舞毒蛾重要的病原微生物之一,影响其种群数量动态。LdNPV的发生与寄主昆虫中肠环境有关,中肠环境受到幼虫食入植物及其成分的影响,从而影响病毒的致病力。通过外源茉莉酸诱导青杨(Populus cathayana)抗性及4种酚酸,研究它们对舞毒蛾幼虫生长发育及Ld NPV致病力的影响,中肠切片分析酚酸和病毒对中肠的病理变化,分析抗性物质酚酸本身及其对Ld NPV侵染过程的影响。研究结果如下:1.外源JA诱导抗性对舞毒蛾LdNPV致病力的影响取食0.001mmol/L浓度茉莉酸诱导5d、10d青杨的2龄幼虫病毒死亡率与取食正常青杨差异显著,分别比正常青杨的死亡率高13.3%和20.1%(P<0.05);诱导青杨接毒的2龄幼虫死亡率显著高于正常青杨接毒的。正常青杨与诱导1d、5d、10d青杨饲养的幼虫死亡率显著高于人工食料饲养的,前者比后者分别高了25.8、14.3、29.6和33.8%。诱导青杨饲养的2龄幼虫发育历期比正常青杨显著(P<0.05)。取食0.1mmol/L浓度茉莉酸诱导1d、5d、10d青杨的2龄幼虫病毒死亡率分别比正常青杨饲养的幼虫死亡率高25.9、28.1和28.9%(P<0.05);用诱导5d青杨叶片接毒的幼虫死亡率比正常青杨叶片接毒的死亡率显著高19.0%。正常青杨与诱导1d、5d、10d青杨饲养的幼虫死亡率显著高于人工食料饲养的,前者分别比后者高25.8、40.9、34.9和41.4%。诱导青杨饲养的2龄幼虫发育历期比正常青杨延长。2.外源JA诱导抗性及LdNPV对舞毒蛾生长发育及食物利用的影响外源JA诱导青杨及核型多角体病毒均对舞毒蛾幼虫生长发育及食物利用有明显影响。感染病毒并取食诱导青杨的幼虫体重显著低于对照,发育历期延长,在诱导1d、5d、10d的节点上分别比对照延长了1.0d、1.2d和1.7d;对诱导5d后青杨的取食量显著减少,比对照减少了21.6%,比单独感染病毒的减少了24.2%,但对诱导1d和10d青杨的取食量没有显著变化;相对生长率显著低于对照,同时也低于单独感染病毒的相对生长率。感染病毒且取食诱导1d、5d、10d青杨的消化率(AD)分别比对照低4.3、7.5和7.4%;食物利用率(ECI)降低了17.4、22.0和25.1%,食物转化率(ECD)分别降低了18.0、23.0和27.1%,降低的程度随茉莉酸诱导时间虽有增长趋势,但未达到统计检验的显著性。说明外源茉莉酸诱导青杨抗性,增强了核型多角体病毒对舞毒蛾幼虫食物利用的抑制作用。3.酚酸及LdNPV对舞毒蛾生长发育及繁殖的影响单独酚酸的影响:单宁酸、绿原酸对幼虫幼龄阶段影响较大,其中单宁酸处理第12d幼虫死亡率达到22.2%,显著高于对照3.3%(P<0.01),2种酚酸使幼虫虫体瘦小,发育历期显著延长,不能正常蜕皮,到4龄期时全部死亡。丁香酸、水杨酸可使幼虫幸存至蛹和成虫,雌性蛹重较对照显著增加,但产卵量和卵受精率均显著降低。其中,取食含丁香酸饲料的成虫产卵量和卵受精率分别比CK减少近90粒和降低约35%,雌性成虫比例下降。酚酸及LdNPV的影响:感染病毒且取食丁香酸、单宁酸和绿原酸的幼虫,在取食4~12d死亡率增加明显,其中,取食丁香酸的幼虫死亡率在第12d急剧达到57.8%,显著高于CK 3.3%(P<0.01),也显著高于接毒对照(CK+V)16.7%(P<0.05)。取食单宁酸和绿原酸的幼虫病毒死亡率一直呈上升趋势,最终达到100%,幼虫发育历期显著延长,虫体瘦小,脱皮时头壳不易脱落,到4龄期全部死亡。水杨酸、丁香酸使感染病毒的舞毒蛾羽化率、产卵量和受精率显著低于单独感病(CK+V)的,且与CK达到极显著差异,其中,丁香酸处理的产卵量和卵受精率比CK减少近400粒和降低约43%,雌性成虫的比例显著下降。4.酚酸及LdNPV对舞毒蛾幼虫中肠组织细胞的病理分析单独取食绿原酸、单宁酸的幼虫中肠细胞在12h时细胞排列不整齐,柱状细胞、杯状细胞开始变形,24h时微绒毛开始脱落稀少,48h时杯腔膨大,72h时顶膜微绒毛大量脱落,96h时细胞模糊不清,开始消融。单独感染病毒的幼虫12h时中肠细胞排列不整齐、细胞变形,24h时细胞间隙增大,48h时柱状细胞细胞核增大,72h时细胞模糊不清,96h时细胞内可见病毒粒子。感病且取食酚酸的幼虫中肠细胞发生病变的时间较单独酚酸和单独病毒要早,即病变发生的速度变快,程度严重,尤其是取食绿原酸和单宁酸的幼虫中肠细胞,最终在消融细胞内可见大量病毒粒子。