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根皮苷是根皮素的葡萄糖苷,属于植物黄酮类中的二氢查尔酮苷,它广泛存在于多种植物组织中,其中苹果的树枝、叶以及苹果果实中提取含量尤其高,曾一度被认为是苹果中的特征性物质。本研究首先建立了一种快速测定苹果树枝、叶中根皮苷含量的RP-HPLC检测方法。色谱条件为Waters Symmetry C18柱（150mm×4.6mm,Φ5μm）,流动相为甲醇和pH为2.6的磷酸水溶液（50: 50）,等度洗脱,柱温为30℃,287nm紫外检测,流速为0.6mL·min-1,在10min内可实现苹果树枝、叶中根皮苷的快速分离。分析结果表明:根皮苷在0.304.50μg范围内呈良好的线性关系,相关系数R2=0.9993,加标回收率98.95%,RSD为1.22%,说明该方法准确可靠。然后以苹果树枝为原料,使用乙醇溶剂从中提取根皮苷,并采用HPLC法测定提取液中根皮苷的含量。在单因素试验的基础上,通过正交实验设计进行工艺参数优化。结果表明,对苹果树枝中根皮苷提取效果影响的大小顺序为:液料比、提取温度、乙醇浓度、提取时间;其最佳提取工艺为:液料比20mL/g,提取温度70℃,乙醇浓度为60%,提取时间为90min。在此优化工艺条件下,根皮苷的提取含量为39.2 mg/g。为了获得高纯度的根皮苷,运用高效离心分配色谱技术对苹果树枝乙醇提取物中的根皮苷进行分离纯化。通过对两相溶剂体系、转子转速和流动相流速等参数进行系统的优化实验,得到了满意的分离效果。结果表明:最佳两相溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（1:5:1:5,v/v）,上相有机相为固定相,下相水相为流动相,转子转速为1500 rpm,流速为3.0 mL/min,紫外检测波长为287nm。在此条件下,在30min内,从纯度为17.91%苹果树枝乙醇提取物中一步分离纯化得到根皮苷,高效液相色谱法测定其纯度为91.20%,根皮苷的回收率为98.10%。采用多酚氧化酶（PPO）对根皮苷进行酶法合成根皮苷氧化产物（POP）,氧化动力学显示,在40min内,根皮苷被全部氧化,60min内全部转变为POP。多酚氧化酶氧化产物的具体途径是:首先根皮苷几乎全部转变为无色中间体（POP1）,然后在没有任何副反应下转变为黄色素（POP2）。