研究背景与目的随着代谢性疾病的流行,非酒精性脂肪肝病（NAFLD）的发病率持续上升。NAFLD的发病与生活习惯有密切关系,对其早发现,早治疗可有效降低肝纤维化和肝癌的发病率与死亡率,减轻社会和患者的医疗负担。临床上常用治疗NAFLD的药物存在肝肾损伤、增加心血管疾病风险等副作用,寻找高效安全的药物治疗NAFLD迫在眉睫。“藏红曲”原名“青稞红曲”,是以青稞籽粒为基质接种红曲霉菌发酵的新型红曲类藏药。藏红曲与中药“红曲米”均为药食两用药材,主要含有洛伐他汀等他汀类成分,同时藏红曲还含有具降脂和保护胃肠道作用的β-葡聚糖。前期研究表明,藏红曲降脂作用优于红曲米。在临床应用中发现藏红曲可以显著改善血脂异常患者血脂及空腹血糖水平,血脂异常是引起NAFLD发病的重要因素,鉴于此,本研究对藏红曲抗非酒精性脂肪肝的药效学、代谢组学及作用机制进行了探讨,为藏红曲抗非酒精性脂肪肝的临床应用及新药开发提供依据。研究方法与结果1.藏红曲抗非酒精性脂肪肝作用药效评价采用喂饲高脂高果糖高胆固醇饲料诱导金黄地鼠形成非酒精性脂肪肝模型。模型建立成功后,将金黄地鼠随机分为洛伐他汀组、洛伐他汀+β-葡聚糖组、藏红曲提取物低剂量组和高剂量组、模型组,以对照饲料饲养的金黄地鼠作为空白组;给药组连续灌胃给药4周后麻醉取血,脱颈椎处死动物并取肝组织和脂肪组织;检测血清中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平,计算肝指数和脂肪指数,分析肝脏病理检测结果,评价藏红曲抗非酒精脂肪肝效果。结果显示,藏红曲提取物可以有效抑制高脂高果糖高胆固醇饲料诱导的金黄地鼠体重增加及肝指数升高,并减少腹部脂肪及附睾脂肪沉积;洛伐他汀+β-葡聚糖和藏红曲提取物可有效降低血清中TG、TC和LDL-C水平,升高HDL-C水平;洛伐他汀+β-葡聚糖和藏红曲提取物还可以改善肝脏状态,减少肝脏中脂质堆积。2.基于代谢组学研究藏红曲对非酒精性脂肪肝的肝脏代谢物的影响采用超高效液相色谱串联傅里叶变换质谱技术（UHPLC-Q Exactive）检测金黄地鼠肝脏中代谢物,应用主成分分析和正交最小偏二乘判别分析对数据检验,寻找显著差异代谢物。通过数据库对代谢物注释,获得差异代谢物信息,对差异代谢物与药效指标进行关联分析。通过对差异代谢物涉及通路进行富集分析,结合文献寻找藏红曲抗非酒精性脂肪肝作用通路。结果显示,藏红曲提取物对肝脏中代谢物的影响主要涉及鞘脂代谢,甘油磷脂代谢和胆碱代谢通路,通过调节神经酰胺、鞘脂、甘油磷脂等脂质代谢,显著减少肝脏中的脂质积累。3.基于脂肪酸氧化、脂肪酸合成和胆固醇代谢通路探讨藏红曲抗非酒精性脂肪肝作用机制采用蛋白免疫印迹技术检测金黄地鼠肝脏中脂肪酸氧化相关蛋白表达水平（PPARα,CPT1A,ACOX1,ACSL1）、脂肪合成相关蛋白表达水平（SREBP-1,FAS,ACC,Ace CS1）及胆固醇代谢相关蛋白表达水平（HMGCR,LDLR,CYP7A1）。结果显示,藏红曲提取物可提高金黄地鼠肝组织中PPARα、ACOX1、CPT1A和肝细胞线粒体中ACSL1的表达,促进肝脏中脂肪酸的氧化;藏红曲提取物可降低肝组织中SREBP-1、FAS、Ace CS1的表达,减少肝脏中脂肪酸的合成。同时,洛伐他汀+β-葡聚糖和藏红曲提取物可降低肝脏中HMGCR的水平,增加LDLR和CYP7A1的表达,减少胆固醇在体内的合成,促进胆固醇代谢。结论藏红曲提取物对高脂高果糖高胆固醇饲料诱导的金黄地鼠非酒精性脂肪肝有治疗作用,可影响肝脏中鞘脂,磷脂等脂质代谢物变化,通过增加脂肪酸氧化,降低脂肪酸合成和促进胆固醇代谢发挥作用。藏红曲中β-葡聚糖对抑制肝脏脂肪变性有辅助作用。