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目的:MicroRNAs(miRNAs)已被证实在心肌梗死的发生发展中起着重要作用。MiRNA-30a-5p是miRNA-30家族的一员,也是心肌梗死后纤维化中TGF-β1通路的上游调节因子。整合素β3在血小板和内皮细胞内表达,并影响趋化因子和细胞因子的表达,包括转移生长因子β1。本研究旨在观察miR30a在转化生长因子β1调节中的作用,探讨心肌缺血中miR30a、整合素β1和转化生长因子β1的表达。方法:1、我们通过不同的网站软件分析,发现整合素β3有很大可能同时是miRNA-30a-5p的下游靶点和转化生长因子β1的上游靶点,这些软件包括TargetScan version 6.2(http://www.targetscan.org),MiRanda(http://www.microrna.org),DIANAmicroT version3.0(http://diana.cslab.ece.ntua.gr,)and miRDB(http://mirdb.org/miRDB).2、实验用的心肌成纤维细胞是从刚出生1-3天的SD大鼠乳鼠的心脏中提取。将提取的原代成纤维细胞分成4组(每组有2皿)。其中三组分别转染miRNA-30a-5p上调腺病毒、miRNA-30a-5p下调腺病毒以及空载病毒组。还有一组不做转染作为对照组。四组中每组取出一皿细胞,一起用无糖培养基培养并置于5%二氧化碳和95%氮气的无氧环境中培养6个小时做心肌梗死模型。分别标记为对照组、对照+缺氧组、空载病毒+缺氧组、过表达miRNA-30a-5p+缺氧组以及抑制miRNA-30a-5p+缺氧组。实时荧光定量PCR法(realtime-qPCR,rt-PCR)检测各组细胞中miR-30a-5p及转化生长因子β1、整合素β3的mRNA的表达变化;蛋白印迹法(Western Blot,WB)检测转化生长因子β1和整合素β3的蛋白的表达变化。3、重新提取4皿心肌成纤维细胞,其中两皿进行过表达miR-30a-5p腺病毒的转染。并且将一皿未处理的细胞和一皿转染病毒的细胞分别转染小干扰RNA,从而将抑制整合素β3的表达,然后将四皿细胞同时进行缺氧无糖处理6小时后,分别通过实时荧光定量PCR法和蛋白印迹法检测四皿细胞中的转化生长因子β1的表达水平。结果:1、实时荧光定量PCR结果显示,在心肌梗死模型中,ITGβ3和TGF-β1的表达升高,过表达miRNA-30a-5p能抑制ITGβ3和TGF-β1的表达与对照+缺氧组以及空载病毒+缺氧组相比,整合素β3和转移生长因子β1的mRNA水平在上调组中显著降低而在下调组中升高,(P<0.05)。并且蛋白印迹法检测的结果与rt-PCR的结果一致,(P<0.005)。缺氧导致整合素β3和转移生长因子β1的表达上升,(P<0.05)。2、通过干扰整合素β3的表达,干扰组的细胞中转化生长因子β1的表达比非干扰组显著增加,(P<0.05)。结论:MiRNA-30a-5p可以通过抑制整合素β3的表达来调控转化生长因子β1的表达,miRNA-30a-5p可能成为心肌梗死后心肌纤维化的新的治疗靶点。