ECRG1基因是我室利用差异显示的方法克隆的一个食管癌相关基因。以往研究已表明，它在体内外可以抑制肿瘤细胞的生长，这意味着它可能对食管癌癌变机理、治疗和预防有着重要意义。为更全面、更深入的认识其作用机制，本文从三部分展开ECRG1编码蛋白的功能研究。 第一部分 ECRG1基因在毕氏酵母中的表达、纯化 我们利用甲醇酵母为表达宿主，构建了以分泌性表达载体pPIC9k为介导的重组体，并在ECRG1的C端加上6×His标签，将构建成功的重组体转入酵母GS115，然后通过转化子对G418抗性能力差异筛到ECRG1基因高拷贝整合的表达菌株，进而在终浓度0.5％甲醇的诱导下，得到预期表达的ECRG1蛋白。SDS-PAGE的初步实验分析表明甲醇酵母表达量达2mg／L，虽然蛋白的表达量相对较低，但得到是可溶性蛋白，能够较容易开展深入的工作。进而我们在适宜的条件下，对表达量较高的克隆进行了发酵，并利用亲和层析的方法纯化ECRG1重组蛋白，最终获得了一定量的蛋白，可进一步开展抗体的制备及蛋白其它相关功能的研究。 第二部分 ECRG1基因与Miz-1的相互作用的体内外验证及功能相关研究 利用体外GST pull-down法、体内免疫共沉淀法，验证了ECRG1与Miz-1之间存在着相互作用。并对ECRG1与Miz-1进行共定位。将pEGFP-N1-ECRG1