褐藻寡糖主要是通过降解褐藻胶得到的低聚糖类,具有多种生物活性。海带在沿海地区种植广泛,是一类主要用于提取褐藻胶的褐藻类植物。本文优化了从海带中碱提褐藻胶、生物酶解法降解褐藻胶制备褐藻寡糖的工艺条件;对褐藻寡糖进行了分离纯化,并进行寡糖成分分析;比较了酸解法和酶解法制备的褐藻寡糖的生物活性;对褐藻寡糖作为水产饲料添加剂应用于水产养殖的效果进行了评价。具体研究结果如下:1、采用碱提醇沉法提取褐藻胶,确定碱提褐藻胶的工艺条件为:碱提时间4 h,碱提温度80℃,碱浓度1%,液料比70:1(v/w),在此条件下,褐藻胶得率为30.30%。2、在单因素实验基础上,采用响应曲面法研究了酶解温度、加酶量和pH对褐藻胶水解度的影响,确定最佳酶解工艺条件为:酶解时间3 h,底物浓度0.7%,pH7.0、温度49.37℃、加酶量0.33U/mL,水解度可达64.60%。经薄层层析、质谱、核磁共振波谱分析,酶解产物为褐藻寡糖DP1、DP2、DP3。不同时间梯度所得到的主要酶解产物不同,确定该褐藻胶裂解酶为内切酶。3、酶解产物经Bio-gel P6分离,得到高纯度的褐藻寡糖DP1、DP2、DP3。4、生物活性研究表明,酶解产物混合物、酸解产物混合物、褐藻三糖DP3均有较好的羟自由基、ABTS、DPPH清除活性及还原力,褐藻二糖DP2具有一定的ABTS和DPPH清除活性,但其羟自由基清除活性和还原力的效果不明显。酶解产物、酸解产物和褐藻三糖均具有酪氨酸酶双酚酶抑制活性,IC50分别为6.05 mg/mL、3.68 mg/mL、0.75 mg/mL。5、抑菌活性研究表明,酶解产物、酸解产物和褐藻三糖DP3抑制创伤弧菌的MIC分别为1.37 mg/mL、3.71 mg/mL、1.18 mg/mL;抑制弗尼斯弧菌的MIC分别为3.71 mg/mL、4.30 mg/mL、0.17 mg/mL;抑制副溶血弧菌的MIC分别为1.11 mg/mL、4.87 mg/mL、0.85 mg/mL。6、水产养殖试验表明,褐藻寡糖极显著地提高了大黄鱼和石斑鱼的体重、全长、存活率,大黄鱼和石斑鱼肌肉中的蛋白质含量、EAA/TAA和EAA/NEAA的比例,大黄鱼血清中CAT和溶酶菌活力,石斑鱼血清中ACP、AKP、CAT和溶菌酶的活力,大黄鱼和石斑鱼消化系统中的蛋白酶活性(P<0.01)。本课题从海带中提取褐藻胶,利用酶法制备褐藻寡糖,对寡糖的成分及活性进行研究;并将酶解寡糖应用于水产饲料,为褐藻寡糖的开发利用提供理论依据。