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黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,简称AFB1）是黄曲霉毒素（AF）中的一种,AFB1因其肝毒性强、危害大、分布广而被列入一级致癌物。AFB1为前致癌物,进入体内经Ⅰ相药物代谢酶催化代谢为黄曲霉毒素B1-8,9-环氧化物（AFBO）,肝脏为其主要靶器官,可造成肝损伤,甚至诱发肝癌。肝脏结合解毒是消除代谢物毒性的主要方式,其中谷胱甘肽-S-转移酶（GST）是肝脏的主要解毒酶,而黄曲霉毒素B1-8,9-环氧化物-谷胱甘肽加合物（AFBO-GSH）是评价GST能否解毒AFB1的主要指标之一。姜黄素（curcumin）是姜黄的活性成分,具有抗炎、抗氧化及提高机体免疫力等功效,可激活Nrf2-ARE通路对抗氧化应激,但其作用机制尚不明确,尤其是姜黄素能否通过促进肝脏的解毒机制干预AFB1的肝毒性未见报道。本实验选择国内饲养量大的Arbor Acres（AA）肉鸡作为实验动物,从mRNA、蛋白质表达水平、酶活性三个层次来探讨AFB1对肉鸡肝脏Nrf2和主要II相解毒酶表达的影响及添加姜黄素对AFB1造成上述影响的改变。并采用高效液相色谱法检测加合物AFBO-GSH含量的变化以此来评价GST的解毒能力。本研究将阐明AFB1致肉鸡亚急性肝损伤和姜黄素如何影响核因子NF-E2相关因子（Nrf2）及其下游靶基因GSTA家族与GSTM家族部分亚型（GSTA、GSTA3、GSTA4和GSTM2）、环氧化物水解酶1型（EPHX1）的表达,从而缓解AFB1诱导的肉鸡亚急性肝损伤作用。研究结果如下:1、AFB1和/或姜黄素对肉鸡肝脏Nrf2及II相酶（GST、EPHX1）的影响本实验采用病理组织学切片法（HE染色）、RT-PCR和Western-Blot法,研究了饲料中连续添加AFB1(5 mg·kg-1)及不同剂量姜黄素(150 mg·kg-1、300 mg·kg-1和450 mg·kg-1)28d对AA肉鸡肝脏Nrf2及相关II相解毒酶（GSTs、EPHX1）的影响。结果显示,连续染毒28d,AFB1组肉鸡Nrf2基因及蛋白表达极显著低于空白对照组（P<0.01）;II相酶GSTA、GSTA3、GSTA4、GSTM2和EPHX1基因表达极显著低于空白对照组（P<0.01）;GSTA3蛋白表达极显著低于空白对照组（P<0.01）;病理组织切片结果显示,AFB1组肉鸡肝细胞变性坏死现象严重,表明AFB1对肉鸡肝脏造成损伤,而姜黄素干预组肉鸡肝组织AFB1损伤症状被显著缓解,且缓解程度与姜黄素剂量呈正相关,表明姜黄素对AFB1诱导的肝损伤有保护作用。姜黄素对照组与空白对照组相比各项指标未见显著差异（P>0.05）,说明添加的姜黄素浓度对肉鸡无不良影响。与AFB1染毒组相比,中、高剂量姜黄素能够极显著提高Nrf2及II相酶GSTs、EPHX1基因的表达（P<0.01）;高剂量姜黄素能够极显著提高Nrf2、GSTA3及GSTM2蛋白的表达（P<0.01）,说明姜黄素是通过提高Nrf2及其下游II项酶通路的表达来抵抗AFB1诱发的氧化应激及其肝损伤。停止染毒及姜黄素干预后第7d（即实验第35d）,各组肝脏指标变化趋势与28d相似,AFB1组AA肉鸡肝脏仍呈现明显的肝损伤状态,高剂量姜黄素对AFB1诱导的AA肉鸡亚急性肝损伤仍存在持续的保护作用。说明AFB1对肉鸡肝脏Nrf2及II相酶（GST、EPHX1）的影响在停毒7d内具有后遗毒性,而且姜黄素的干预作用在停药7d内有持续性。2、AFB1及姜黄素对肉鸡肝脏GST活性及其催化AFBO解毒能力的影响连续染毒28d,与空白对照组相比,肉鸡肝组织内GST酶活性极显著降低（P<0.01）,姜黄素干预组与AFB1组相比,GST酶活性有所提高但未见显著差异。将肉鸡肝微粒体分别与丁基羟基茴香醚（BHA）诱导小鼠肝胞液、对照组肉鸡肝胞液、添加姜黄素肉鸡肝胞液及不添加肝胞液放入缓冲液中进行反应,采用高效液相色谱法对上清液中加合物进行分析检测。结果显示仅在添加姜黄素的一组上清液中检测到AFBO-GSH加合物。停毒停药7d后,各组GST酶活性趋势及AFBO-GSH加合物检测结果与28d相似。说明姜黄素提高了肉鸡肝组织GST酶活性,促进谷胱甘肽（GSH）与AFBO的结合,从而起到解毒作用,并且其干预作用在停药7d内有持续性。以上结果表明,连续28d饲喂含有5 mg·kg-1 AFB1的饲料能够造成AA肉鸡亚急性肝损伤,且损伤不可逆;肉鸡体内共检测到以下参与解毒的II相酶亚型:GSTA、GSTA3、GSTA4、GSTM2和EPHX1;姜黄素通过上调Nrf2及上述II相酶的表达,促进AFBO与GSH结合解毒改善AFB1诱导的肝损伤,以高剂量干预效果最佳,这是姜黄素缓解AFB1致AA肉鸡肝损伤的作用机制之一。建议姜黄素混饲的干预剂量为450 mg·kg-1。