论文部分内容阅读
目的：体外研究热CO2气腹对人胃癌细胞SGC-7901的杀伤作用,探讨临床上腹腔镜胃癌手术中使用热CO2气腹抑制腹膜转移和戳孔种植的可行性。方法：建立体外热CO2气腹实验模型,体外模拟人体热CO2气腹的实验模型装置包括：CO2钢瓶、加热器及气腹箱。工作原理如下：CO2气体从钢瓶释放后,进入加热器,加热至预设温度(42℃、43℃),注入气腹箱,气腹箱壁已预先加热至37℃以模拟人体腹壁,气腹箱内设有热敏元件及压力感受器,通过调节CO2气体流量,控制气腹压力为13mmHg,并保持恒定。取对数生长期的人胃癌细胞SGC-7901载于6孔板或96孔板置于气腹箱内,暴露于温度、流量和压力恒定的热CO2气腹环境中。人胃癌细胞SGC-7901经处理后,WST-8法检测细胞毒作用,流式细胞术、Hoechst33342/PI荧光显微镜观察,RT-PCR检测Bax、bcl-2基因mRNA的表达,探讨细胞死亡的机制。结果：WST-8法检测表明热CO2气腹能显著抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖,43℃作用3h后,细胞存活率降至(65.83±2.40)%。流式细胞术及细胞形态学观察表明,诱导人胃癌细胞凋亡是热CO2气腹作用的主要机制。高温度、长时间的热CO2气腹作用能更快地诱导细胞凋亡作用效果呈温度-时间依赖性。RT-PCR检测结果表明,实验组(43℃,3h)Bax基因mRNA表达水平显著高于对照组(25℃,3h)(P<0.05),但对bcl-2的表达无明显影响。结论：热CO2气腹通过诱导细胞凋亡对人胃癌细胞有显著的增殖抑制作用,可能通过上调Bax的表达促进细胞凋亡。有必要通过动物实验进一步探讨热CO2气腹对胃癌腹膜转移的影响及其机制,评估在临床上的应用价值,有望为腹腔镜胃癌手术中腹膜转移和戳孔种植的防治提供一种新的思路和方法。