葡萄组培脱毒快繁技术研究

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本论文以金星无核、维多利亚、藤稔等三个葡萄品种的新梢单芽茎段为材料,探讨了不同外植体消毒时间、不同外植体大小、不同培养基对葡萄组培快繁的影响。试验结果如下:将三种不同消毒时间处理的金星无核外植体接种到启动培养基中培养,20天后统计全部污染率、褐变率和成活率。试验结果表明,当外植体用0.1%升汞消毒5min时,污染率最高68%,褐变率最低13%;当外植体用0.1%升汞消毒8min时,污染率和褐变率适中,成活率最高54%;当外植体用0.1%升汞消毒11min时,污染率最低2%,褐变率最高86%。金星无核外植体适宜的消毒时间为8min。将三种不同大小的金星无核外植体接种到启动培养基中培养,30天后统计茎段萌芽率及观察芽的生长情况。试验结果表明,0.2~0.5cm外植体总体萌芽较慢,芽的生长也较慢,愈伤组织较少;0.5~1.0cm外植体萌芽较快,芽的生长也较快,植株健壮,愈伤组织较多;1.0~2.0cm外植体愈伤组织较少,萌芽较快,但生长较细弱,三种不同大小外植体的萌芽率分别为62%、67%和61%。金星无核葡萄组培适宜的外植大小为0.5~1.0cm。以金星无核外植体为材料,以1/2MS为基本培养基,探讨不同6-BA浓度对葡萄启动培养的影响。试验结果表明,当6-BA浓度为0.5mg/L时,金星无核的萌芽率为36%,增殖系数为0.4;当6-BA浓度为1.0mg/L时,金星无核的萌芽率为59%,增殖系数为1.4;当6-BA浓度为2.0mg/L时,金星无核的萌芽率为62%,增殖系数为1.5。金星无核葡萄组培适宜的启动培养基为1/2MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.05mg/L。以金星无核无菌苗为材料进行生根培养,选用1/2MS为基本培养基,探讨不同激素配比对葡萄组培苗生根的影响。试验结果表明,金星无核葡萄适宜的生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L。以金星无核、维多利亚、藤稔等三个不同葡萄品种的外植体为材料,以1/2MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.05mg/L为启动培养基,对比不同葡萄品种的组培效果。试验结果表明,金星无核、维多利亚、藤稔的萌芽率分别为59%、50%、18%,增殖系数分别为1.3、1.1、0.3。藤稔的萌芽率与另外两个品种的萌芽率存在显著差异,金星无核、维多利亚两个葡萄品种比藤稔更适宜采用组培方法进行繁殖。将金星无核、维多利亚、藤稔启动培养中产生的愈伤组织转入分化培养基MS(改)+6-BA0.5mg/L+NAA0.1m/L中,探讨不同葡萄品种愈伤组织分化率与增殖系数。试验结果表明,维多利亚愈伤组织分化率最高73%,金星无核愈伤组织分化率较高70%,分化出的苗质量最好,藤稔愈伤组织分化率最低23%,增殖最慢。维多利亚在继代培养过程中出现一些畸形黄化症状,其原因可能与6-BA浓度过高或外植体本身带毒有关。在葡萄愈伤组织诱导分化试验中,有极少数愈伤组织会分化出细长的根而不形成苗,其原因有待进一步研究。本论文对三个优良鲜食葡萄新品种进行了组培脱毒快繁技术研究,该技术对葡萄无病毒苗木繁育体系建设及促进葡萄产业化发展具有积极的意义。
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