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研制一种敏感、特异、快速并适用于基层单位应用的胶体金法快速检测试剂，用于人类血清标本中肺炎支原体特异抗体的检测，从而诊断肺炎支原体感染。 肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae，Mp)是引起儿童和成人支气管炎和原发性非典型肺炎的一种重要病原体，20％以上的社区获得性肺炎(community-acquiredpneumonias)是由Mp引起的，并且已成为因重症肺炎而住院的老年患者的重要病因。 支原体肺炎无典型的临床体征，因此MP感染依赖于实验室。近年来虽然发展了一些临床检测的新方法，如实时定量荧光PCR技术，但MP特异性抗体检测，仍是MP感染诊断的重要方法之一。 本研究采用灭活的Mp菌体纯化抗原致敏硝酸纤维素膜，同时用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)作为探针，利用免疫层析原理研制MP抗体快速检测胶体金试剂，用于MP肺炎诊断。本研究主要内容包括：肺炎支原体灭活全菌体抗原的制备和检定、抗原致敏的最佳浓度和条件的选择、免疫胶体金探针最佳标记剂量、以及所研制的免疫胶体金法快速检测MP抗体试剂的初步考核。 研究显示，我们成功培养了肺炎支原体，并获得了纯化的MP灭活菌体抗原，通过荧光显微镜可观察到直径大小约为0.3μm，呈亮绿色、边界清晰的圆形颗粒的Mp灭活的完整菌体。根据颜色反应，胶体金标记SPA的最低稳定浓度为每ml胶体金溶液需要SPA 5μg，最佳标记量为每ml胶体金溶液需要SPA 6μg。不同浓度Mp灭活菌体抗原溶液经BIO-DOT型XYZ3000点样仪致敏硝酸纤维素膜，结果观察3mg／ml Mp灭活菌体抗原致敏硝酸纤维素膜检测带的颜色反应最好。因此确定Mp灭活菌体抗原致敏硝酸纤维素膜蛋白浓度为3mg／ml。胶体金与蛋白质结合一般在蛋白质等电点(PI)略偏硷的条件下比较牢固，经过试验选择SPA标记的最佳pH6.0。以保存液作对照，用分光光度计测定试验中胶体金标记SPA探针在520nm处的A值为3.51，在适宜的A值(2.5-10)范围内。胶体金偶联SPA后在电镜下观察，可见金颗粒外周有明显的低电子密度晕圈，表