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microRNA(miRNA)可以参与肌肉许多功能的调控。有些miRNA可以调节肌细胞的增殖和分化，如miR-1、miR-133、miR-26a、miR-27b、miR-29、miR-125b、miR-155、miR-181、miR-214等。有些miRNA可以调节肌纤维类型的转变，如miR-208。此外，研究发现miRNA也在肌管的肥大与萎缩，肌肉的各种疾病等方面发挥着重要的作用。miR-199a-3p有两个前体，分别位于发动蛋白2(dynamin2)和发动蛋白3(dynamin3)内含子的互补序列中。发动蛋白是对肌肉发育非常重要的蛋白。MiR-199a在杜氏肌营养不良中被上调，肌细胞分化的负调控因子TGF-β可以上调miR-199a-3p的表达。通过靶基因预测，我们发现miR-199a-3p可以靶定对肌细胞分化起着非常重要的信号通路，mTOR信号通路上的多个因子，包括IGF-1、PIK3r1(p85)、mTOR、RPS6KA6等。因此我们预计miR-199a-3p也在肌细胞的分化中发挥着一定的作用，然而这还需要进一步进行验证。本文首先运用RT-qPCR技术探究了miR-199a-3p在C2C12成肌细胞分化过程中的表达趋势；用miR-199a-3p的mimic和inhibitor转染C2C12成肌细胞并诱导分化后，免疫荧光检测超表达或干扰miR-199a-3p对肌管形成的影响，RT-qPCR和WB技术探究对成肌分化标记基因和其靶基因mRNA和蛋白表达的影响；然后构建了miR-199a-3p靶基因的荧光素酶报告载体，通过荧光素酶报告载体系统验证IGF-1、PIK3r1(p85)、mTOR、RPS6KA6是否是miR-199a-3p的直接靶基因。进一步揭示了miR-199a-3p对成肌分化作用的机理。主要获得如下结果：(1)确定了miR-199a-3p的组织分布和在成肌分化过程中的时序表达，发现miR-199a-3p高表达于肺脏和肌肉等组织，并且随着肌细胞的分化呈现出逐渐上升的表达趋势，第6d达到最高，第8d略有下降。(2)在成肌细胞中转染miR-199a-3p模拟物后，肌管的形成显著减少，融合指数和肌管直径降低，成肌分化标记基因Myf5、MyoD、MyoG、MyHC mRNA表达显著降低。MyoG、MyHC蛋白的表达也显著降低。(3)干扰miR-199a-3p后，肌管的形成增加，融合指数和肌管直径升高，标记基因MyoG、MyHC mRNA和蛋白表达均显著升高。肌萎缩标记基因MuRF1的mRNA表达降低。(4)在C2C12成肌细胞中过表达miR-199a-3p后，其靶基因IGF-1、mTOR、RPS6KA6mRNA表达水平降低，mTOR信号通路活性降低。在C2C12成肌细胞中过干扰miR-199a-3p后，IGF-1、mTOR、RPS6KA6的mRNA表达水平升高。(5)构建了IGF-1、PIK3r1(p85)、mTOR、RPS6KA6的荧光素酶报告载体且与miR-199a-3p的mimic共转293T细胞后，这几个基因3′UTR的荧光素酶活性降低。