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葡萄斑点病为世界性分布的病毒病，在我国仅见辽宁、山东、新疆等地有该病的零星报道，该病在大多数葡萄栽培品种和砧木上不表现明显症状，建立快速检测方法对该病毒的防治具有重要作用。 本研究采用血清学方法对从中国农科院郑州果树所葡萄种质资源圃和湖北省农科院果茶研究所收集的10份葡萄样品进行了病毒检测，其中4份样品可能带有葡萄B病毒(Grapevine Virus B,GVB)，2份样品可能带有葡萄扇叶病毒(Grapevine FanLeaf Virus,GFLV)，1份样品可能带有葡萄卷叶相关病毒-1(Grapevine LeafRoll associated Virus,GLRaV-1)，2份样品带有葡萄斑点病毒(Grapevine Fleck Virus,GFkV)。以带GFkV的胜宝为样品，分别采用A蛋白酶联免疫吸附法(Protein A Sandwich-ELISA,PAS-ELISA)、酶联板捕获抗原酶联免疫吸附间接法(Plate Trapped Antigent-Indirec-ELISA,PTA-I-ELISA)和三抗体夹心法(indirect Triple Antibody Sandwich-ELISA,TAS-ELISA)，对不同稀释度的葡萄韧皮部粗提液进行检测。结果表明：当对带有GFkV的葡萄样品韧皮部粗提液进行稀释时，三种方法的检测灵敏度分别为：经PTA-I-ELISA检测的灵敏度为1：200；经PAS-ELISA检测的灵敏度为1：500；经TAS-ELISA检测的灵敏度为1：2000。采用间接的组织免疫印迹分析(Indirect Tissue Blot Immunoassay,DTBIA)和圆点印迹分析(Dot-Immunobinding Assay，DIBA)，无论叶片或叶柄均可检测出GFkV，这两种方法结果直观，所需时间较短。此外，采用免疫电镜技术对胜宝进行了分析，电镜观察结果表明，在该样品中存在球状的病毒粒子，且该粒子明显受GFkV的多克隆抗体所修饰，进一步证明GFkV的存在。采用免疫捕捉反转录PCR(Immunocapture-RT-PCR,IC-RT-PCR)对胜宝样品进行检测，结果扩增出大小约为380bp的片段，较目标片段大。