干扰素（Interferon,IFN）是由淋巴细胞和单核细胞产生的一类具有抗病毒、抗肿瘤及调节机体免疫功能等多种生物学活性的糖蛋白。IFN不能直接作用于病毒,而是通过与其相应的受体结合激活IFN信号通路发挥抗病毒作用。在干扰素家族中,III型IFN是最新鉴定的成员,与I型IFN具有相似的抗病毒功能。与I型IFN受体的广泛分布不同,III型IFN的受体主要分布于上皮细胞和部分树突状细胞,具有组织特异性好、毒副作用小的优点。因此III型IFN在临床应用中有巨大潜力,有望在将来成为新的基因工程药物。但目前宠物临床上尚无犬用III型干扰素生物制品。原核表达系统是已经普遍应用于外源蛋白表达的系统,具有廉价和易于纯化的特点,可通过高密度发酵大量表达,拥有良好的工业化基础,是实现外源蛋白大规模生产进而推动其实现商品化的重要方法。为了高效制备大量重组CaIFN-λ蛋白,本研究合成了优化的CaIFN-λ基因序列,构建了重组CaIFN-λ蛋白原核载体,并将重组质粒转化进入大肠杆菌进行诱导与表达,通过优化表达条件实现了重组CaIFN-λ蛋白的体外大量表达。由于重组CaIFN-λ蛋白以包涵体的形式表达,利用尿素处理和亲和层析方法,获得了纯化的重组CaIFN-λ蛋白,进一步利用透析技术实现了重组蛋白的复性和浓缩。为了检测复性蛋白的生物学活性,将复性后蛋白处理犬肾上皮细胞系MDCK,发现重组CaIFN-λ可显著诱导干扰素刺激基因MXI、ISG15和2’-5’OAS等的表达,暗示了复性CaIFN-λ可以活化干扰素信号通路。利用表达绿色荧光标签蛋白的水疱性口炎病毒（VSV-GFP）和甲型流感病毒进一步检测重组CaIFN-λ蛋白的抗病毒活性,发现重组CaIFN-λ蛋白剂量依赖性的抑制了VSV-GFP和流感病毒的复制,表明制备的重组CaIFN-λ蛋白具有较高的抗病毒活性。综上所述,本研究构建了高效表达重组CaIFN-λ蛋白的原核表达载体,实现了重组CaIFN-λ蛋白的高效表达,通过纯化和复性获得了具有较高抗病毒活性的重组CaIFN-λ蛋白,为研制新型宠物抗病毒制剂奠定基础。