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第一部分抗苗勒氏管激素在多囊卵巢综合征中的表达及与内分泌和代谢指标的相关性研究目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清抗苗勒氏管激素(AMH)水平变化,及其与患者体质指数(BMI)、代谢紊乱以及激素紊乱的相关性。通过比较肥胖型和非肥胖型PCOS患者AMH的分泌特点,对比这两种亚型是否存在卵泡发育障碍机制的差异,从而为PCOS的个体化治疗提供理论依据。方法将60例PCOS患者根据BMI分为PCOS组1(BMI≥25kg/m2)30例,PCOS组2(BMI<25kg/m2)30例；30例月经周期正常的妇女为对照组,根据BMI分为对照组1(BMI≥25kg/m2)15例,对照组2(BMI<25kg/m2)15例。所有患者用化学发光法测定血清生殖激素(卵泡刺激素、黄体生成素、雌二醇、睾酮、催乳素)水平,所有患者进行糖代谢试验,化学发光法测定空腹血糖和空腹血清胰岛素水平。计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),采用ELISA测定血清AMH水平。分析比较血清AMH在各组的表达及与生殖激素和代谢指标的相关性。结果PCOS组1和PCOS组2间血清AMH水平差异无统计学意义(P>0.05),但2组均高于对照组(P<0.05)。PCOS组1与PCOS组2患者LH、LH/FSH、睾酮、空腹胰岛素及HOMA-IR均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PCOS组1LH、LH/FSH低于PCOS组2,空腹胰岛素、HOMA-IR高于PCOS组2(均P<0.05)。PCOS组1AMH水平与睾酮、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR呈正相关,与雌二醇、FSH呈负相关(均P<0.05),与BMI、 LH、LH/FSH无明显相关性(均P>0.05)。PCOS组2AMH水平与LH、LH/FSH、睾酮呈正相关,与BMI、FSH、雌二醇、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR无相关性。结论PCOS患者血清AMH显著升高,其升高与体质指数无关,可能与激素紊乱和糖代谢紊乱具有一定相关性,并可能反映了疾病的严重程度。第二部分二甲双胍对PCOS患者AMH-雄激素-胰岛素相互作用的影响目的通过观察二甲双胍对存在胰岛素抵抗(IR)的PCOS患者血清AMH水平的影响,探讨二甲双胍对PCOS患者的治疗作用,及在AMH-雄激素-胰岛素之间可能存在的作用机制。方法根据第一部分研究结果显示,PCOS组1(肥胖细胞转染后在胰岛素及雄激素存在的情况下,进行双荧光素酶报告基因检测。结果半定量RT-PCR结果显示：：Insulin组、Androgen组和Insulin+Androgen组的AMH, AMHRⅡ的mRNA表达较对照组增强,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。其中Insulin+Androgen组增强更为明显,与Insulin组和Androgen组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示：Insulin组、Androgen组和Insulin+Androgen组的AMH. AMHRⅡ的蛋白表达较对照组增强,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。其中Insulin+Androgen组AMH的蛋白表达增强更为明显,与Androgen组比较差异有统计学意义(P<0.05),Insulin+Androgen组AMHRⅡ的蛋白表达增强更为明显,与Insulin组和Androgen组比较差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化结果显示,胰岛素,雄激素的刺激作用同Western blot检测结果一致,胰岛素,雄激素分别能够对AMH,AMHRⅡ的蛋白水平表达有促进作用,胰岛素和雄激素共同作用,能够协同作用促使AMH,AMHRⅡ的蛋白水平表达更强。双荧光素酶报告基因检测结果显示：在含有AMH启动子调节序列的基因检测中Insulin组、Androgen组和Insulin+Androgen组的AMH启动子活性明显增强,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。其中Insulin+Androgen组AMH启动子活性增强更为明显,与Insulin组和Androgen组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论胰岛素和雄激素可明显增强卵巢颗粒细胞AMH的mRNA和蛋白表达,并可影响AMH的基因启动子活性,且二者之间具有明显协同作用。