从Notch信号通路探讨通利枢机针刺法对脑缺血大鼠Jagged1的影响

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目的:本研究基于中医"少阳主枢"、"少阳枢机不利"相关理论,以Notch信号通路为切入点,建立局灶性脑缺血大鼠模型,运用通利枢机针刺法对模型大鼠进行干预,观察该针刺方法对脑梗死大鼠神经功能缺损、脑梗死体积百分比的及Jagged1蛋白表达的影响.  方法:选取健康雄性SD大鼠60只,适应性喂养1周后选取50只以线栓法制作右大脑中动脉阻塞(Middle cerebral artry occlusion,MCAO)局灶性脑缺血模型.将模型制备成功大鼠随机分为模型对照组、利枢针刺组、普通针刺组、西药灌胃组,余10只大鼠只游离右侧颈部动脉作为假手术组.共5组.假手术组及模型对照组常规消毒左侧外关、阳陵泉;利枢针刺组针刺左侧外关、阳陵泉;普通针刺组针刺百会、大椎;西药灌胃组予以胞磷胆碱钠胶囊灌胃,每组以24h为周期,每日治疗1次,共治疗14次.以神经功能评分、TTC染色变化,观察模型建立情况和各组大鼠脑缺血后脑组织的病理变化情况,用Western-Blot法检测Notch信号通路中Jagged1的表达变化.  结果:①神经功能缺失计分:假手术组大鼠在各个时间段均无神经功能缺失症状;模型对照组、利枢针刺组、普通针刺组及西药灌胃组大鼠的神经功能缺失评分总体呈下降趋势,在术后1d、3d进行组内、组间比较时均无明显差异(P>0.05);在术后7d、14d各组神经功能缺失评分下降较为显著,术后7d时,利枢针刺组、普通针刺组评分与模型对照组具有统计学差异(P<0.05);术后14d利枢针刺组、普通针刺组评分与模型对照组、西药灌胃组之间比较,存在着显著差异(P<0.01),且利枢针刺组与普通针刺组比较也具有统计学差异(P<0.05);②TTC染色:治疗14d后,假手术组大鼠脑组织未见明显梗死,模型对照组、利枢针刺组、普通针刺组、西药灌胃组大鼠脑组织均有不同程度的梗死,四组与假手术组相比较,均存在显著差异(P<0.01);利枢针刺组、普通针刺组、西药灌胃组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);利枢针刺组、普通针刺组与西药灌胃组相比,差异具有显著性(P<0.01);利枢针刺组与普通针刺组比较,有显著差异(P<0.01).③Jagged1的表达:与假手术组相比,模型对照组、利枢针刺组、普通针刺组及西药灌胃组Jagged1的表达均增多,其中模型对照组与假手术组对比,具有统计学差异(P<0.05),其余三组与假手术组比较均存在显著性的差异(P<0.01);利枢针刺组、普通针刺组、西药灌胃组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);利枢针刺组、普通针刺组与西药灌胃组相比,差异具有显著性(P<0.01);利枢针刺组与普通针刺组比较,有统计学差异(P<0.05).  结论:通利枢机针刺法能够显著改善MCAO模型大鼠脑缺血后神经功能缺失评分及脑梗死体积百分比,同时通利枢机针刺法能够显著提高Jagged1蛋白的表达,可能与Notch信号通路的激活有关.
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