【摘 要】
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目的探讨白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-15(IL-15)及其组合对原代小鼠自然杀伤(NK)细胞扩增数量和功能的影响。方法用免疫磁珠分选方法,从小鼠脾脏单个核细胞中得到纯化的NK细胞,台盼蓝染色计算镜下活细胞数,分为IL-2组、IL-15组及IL-2联合IL-15组,研究不同细胞因子浓度在不同时间点下对小鼠NK细胞体外扩增的影响。以YAC-1/GFP细胞为靶细胞,用流式细胞术检测NK细胞在
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目的探讨白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-15(IL-15)及其组合对原代小鼠自然杀伤(NK)细胞扩增数量和功能的影响。方法用免疫磁珠分选方法,从小鼠脾脏单个核细胞中得到纯化的NK细胞,台盼蓝染色计算镜下活细胞数,分为IL-2组、IL-15组及IL-2联合IL-15组,研究不同细胞因子浓度在不同时间点下对小鼠NK细胞体外扩增的影响。以YAC-1/GFP细胞为靶细胞,用流式细胞术检测NK细胞在不同细胞因子不同效靶比作用下的杀伤活性。结果1.加入不同浓度的IL-2培养24、48、72小时,低、中、高浓度组NK细胞的扩增数量在不同时间点均大于对照组,各组间比较有统计学差异(P<0.05),NK细胞的扩增数量不随时间的增加而增加。在同一时间点,NK细胞的扩增能力随着浓度的增加而增加(P<0.05)。2.加入不同浓度的IL-15培养24、48、72小时,低浓度组培养24、48小时与对照组比较有统计学意义(P<0.05),中、高浓度组在不同时间点下NK细胞的扩增数量均大于对照组(P<0.05),在培养24、48小时NK细胞的扩增数量随着浓度的增加而增加,不同浓度组间比较有统计学意义(P<0.05)。3.确定最佳浓度后,IL-2+IL-15联合组在不同时间点下NK细胞扩增数量均大于对照组(P<0.05)。培养24、48小时各实验组间比较无显著统计学意义,在培养72小时各组间比较有统计学意义,为IL-2组>IL-2+IL-15组>IL-15组>对照组(P<0.05)。4.在NK细胞的杀伤实验中,不同效靶比(5:1,10:1)作用下IL-15组、IL-2+IL-15组NK细胞对YAC-1/GFP细胞的均大于对照组(P<0.05)。当效靶比为5:1时,NK细胞的杀伤活性最高,为IL-2+IL-15组>IL-15组>对照组(P<0.05),当效靶比为10:1时,IL-2+IL-15组与IL-15组比较无统计学意义(P>0.05)。结论1.不同浓度的IL-2,浓度越高小鼠NK细胞的扩增数量越多;2.不同浓度的IL-15,浓度越高小鼠NK细胞的扩增数量越多;3.IL-2联合IL-15能增强小鼠NK细胞的体外扩增能力;4.IL-15及IL-2联合IL-15能增强小鼠NK细胞对YAC-1/GFP细胞的杀伤活性,效靶比为5:1时,IL-2+IL-15组的NK细胞杀伤活性最强,IL-15组次之。
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