水貂肠炎病毒及犬瘟热病毒灭活后的联合免疫研究

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水貂肠炎和犬瘟热是能够引起水貂的高度接触性、致死性的传染病,也是影响水貂养殖业的主要疾病,并且给养貂产业造成了巨大的经济损失。目前尚无特效的治疗药物,主要依赖于疫苗接种来预防控制。本研究是用水貂肠炎细小病毒和犬瘟热病毒弱毒株进行灭活后的联合免疫试验研究。用甲醛作为灭活剂,甲醛与MEV-L病毒液按4‰的比例混合,37℃放置48 h灭活;甲醛与CDV-L病毒液按1‰的比例混合,4℃放置24 h灭活。将灭活后的病毒液分别在F81和Vero细胞,盲传三代,用间接免疫荧光检测病毒灭活效果,确定MEV-L和CDV-L已经完全灭活。固定MEV-L的血凝效价为26,与CDV-L病毒液(CDV-L TCID500 10-5.29/mL)分别按1:1(Ⅰ组)、1:2(Ⅱ组)、1:3(Ⅲ组)的量混合,加入10%氢氧化铝胶,充分混匀后免疫大鼠,1.0mL/只。分别在免疫后第0、7、14、30、60和90 d采集血液分离血清。通过血凝抑制试验、血清中和试验以及间接ELISA试验检测各组MEV和CDV的抗体效价。结果表明,MEV和CDV的联合免疫后,第7 d时MEV的HI效价为1:768(Ⅰ组),最低为1:171(Ⅲ组),间接ELISA抗体效价为1:512(Ⅰ组),最低为1:128(Ⅲ组);第30 d达到最高,MEV的HI效价为1:15009(Ⅱ组),间接ELISA抗体效价最高达到1:16384(Ⅱ组);并且在90 d时MEV的HI效价维持在1:2218(Ⅰ组),间接ELISA抗体效价维持在1:2048(Ⅰ组)。第7 d时CDV的血清中和指数最高可达1:100(Ⅰ组),最低为1:37(Ⅲ组);间接ELISA抗体效价最高为1:256(Ⅰ组),最低为1:64(Ⅲ组);第30 d达到最高,CDV的血清中和指数为1:2457(Ⅰ组),间接ELISA抗体效价为1:4096(Ⅰ组);并且第90 d时CDV的血清中和指数仍维持在1:776(Ⅰ组),间接ELISA抗体效价维持在1:1024(Ⅰ组)。综上所述,三组不同比例的CDV和MEV联合免疫均可获得较高水平的抗体,在MEV:CDV是1:1时的免疫效果最佳。
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