论文部分内容阅读
目的:研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)LINC00473在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达情况及其与临床病理特征的关系,验证LINC00473在肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡中的作用,为探讨LINC00473在HCC发生发展中的分子作用机制奠定了基础。方法:通过TCGA数据库筛选出在HCC中未见报道且表达较高的LINC00473。应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)检测20例肝癌患者组织中LINC00473的表达水平,并分析LINC00473的表达水平与患者的年龄、TNM分期等临床病理参数的相关性。通过qRT-PCR检测正常肝细胞Lo2和HepG2、Huh-7、SMMC-7721、Bel-7402、HCC-LM3、HCC-LM9这6种肝癌细胞中LINC00473的表达水平,选取表达量最高的细胞进行细胞功能实验。沉默LINC00473的重组质粒转染肝癌细胞,通过5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine,EDU)细胞增殖实验在24小时、48小时进行增殖检测;Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡。结果:TCGA数据库中发现LINC00473在肝癌患者的癌组织中表达量显著高于癌旁组织。在本地组织样本中,相对于癌旁组织,LINC00473在HCC癌组织中表达水平显著上调,差异有统计学意义(P<0.05)。LINC00473表达水平同患者年龄(P<0.05)、TNM分期(P<0.05)、AJCC临床分期(P<0.05)、AFP(P=0.001)相关,而与患者肿瘤大小、肝炎病史无明显相关(P>0.05)。在正常肝脏细胞Lo2中LINC00473的表达水平显著低于肝癌细胞(P<0.05)。LINC00473在HepG2中表达最高。因此,本研究采用HepG2细胞研究沉默LINC00473对HCC细胞功能的影响。实验结果显示,沉默LINC00473能够抑制HepG2细胞的增殖;抑制细胞侵袭能力;并有效促进HepG2细胞的凋亡。结论:LINC00473在HCC癌组织和肝癌细胞中表达上调,沉默LINC00473能抑制肝癌细胞的增殖、侵袭,促进细胞凋亡。初步揭示LINC00473在HCC发生发展中的作用。