蕙兰‘大一品’组织培养技术及部分国兰品种抗寒性研究

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国兰通常指兰科兰属(Cymbidium)植物中原产于我国的一部分地生种,主要包括春兰及其变种春剑、莲瓣兰,蕙兰、建兰、墨兰、寒兰等。本试验以国兰名品‘大一品’为试验材料,主要研究两方面内容:一是通过改进国兰组织培养中的各个步骤,选择适宜的消毒方式、培养基、激素配比等,建立完整的组培体系;二是通过对国兰进行低温处理和外源施加ABA、PP333处理,探讨不同国兰品种的抗寒性以及ABA、PP333处理对国兰抗寒性的影响。主要的研究结果如下:1、国兰外植体先用75%乙醇浸泡30s,在移入10%次氯酸钠溶液中消毒20min能有效降低外植体污染率,维持较高的成活率。2、通过对国兰组培过程中外植体不同发育阶段的研究,认为适宜国兰‘大一品’根状茎增殖、分化、生根的培养基配方分别为:1/2MS+NAA1.0mg/L+6-BA0.5mg/L+20g/LCM+2g/LAC、MS+NAA0.3mg/L+6-BA2.0mg/L+20g/LCM、MS+NAA3mg/L+6-BA0.1mg/L+20g/LCM+2g/LAC。3、培养基中添加100g/L香蕉泥、减少培养基中N的含量(1/10N),增加P含量(5P)均有利于国兰根状茎芽诱导和分化;麦芽糖为国兰组织培养中的最佳碳源;蔗糖在国兰组织培养中经济、方便,最佳浓度为20g/L。4、组培苗炼苗最佳基质松针:椰子皮:碎砖块=2:3:5,此时幼苗生长状况最好。5、低温引起国兰叶片的电导率增大,诱导合成渗透调节物质和保护性酶抵御胁迫,且喷施ABA和PP333溶液对提高国兰的抗寒性有一定作用。6、低温胁迫引起国兰叶片的叶绿素含量、叶片净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、气孔限制值(Ls)、PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)、光化学耗散能量(Prate)、光合电子传递量子效率(ФPSⅡ)、光合电子传递速率(ETR)、光化学猝灭系数(qP)和光适应下最大光化学效率(Fv′/Fm′)下降,胞间CO2浓度(Ci)、初始荧光(F0)和天线热耗散速率(Drate)上升,经ABA和PP333处理的植株指标波动幅度低于清水处理的植株,且低温危害解除后植物光合机构可快速恢复正常功能,低温胁迫容易导致光合机构的破坏,引发PSⅡ反应中心失活,而ABA和PP333可缓解反应中心受到的伤害,维持较高的光能捕捉能力和同化率,保证国兰叶片的光合作用能力。
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