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在我国,心血管疾病已成为居民致死的主要原因之一,而缺血性心脏病所占的比例最高。心梗发生后,及时有效的再灌注治疗仍可进一步造成心肌缺血再灌注损伤,研究表明血管开通后心肌细胞内瞬时增高的ROS水平是再灌注损伤发生发展的关键作用机制之一。他汀类药物是临床广泛应用的降胆固醇类药物,其药物疗效及安全性得到了多年临床实践的证实。近年来,大量基础实验指出他汀类具有非降胆固醇类多效心肌保护作用途径。但多项研究显示,心梗急性期口服给药难以在心肌部位达到有效的作用浓度。药物递送系统可有望解决他汀这一临床应用限制,为临床治疗心肌缺血再灌注损伤提供有价值的治疗策略。目的:利用聚乙二醇(PEG)修饰金纳米颗粒(AuNPs)表面,形成功能化的金纳米材料。在静电吸附及缩合反应共同作用下荷载普伐他汀(Pravestatins),构建金纳米颗粒介导的普伐他汀(“AuNPs-Pra”)药物复合转运载体。通过体外实验评估其对原代心室肌细胞的生物相容性,筛选出最佳浓度。并进一步评估这一转运载体对体外缺氧复氧心肌细胞模型中ROS及凋亡水平的影响。方法:(1)构建最佳比例的功能化金纳米颗粒,通过透射电镜与纳米粒度及电位分析仪对材料在水溶液中的微观结构及表面电荷进行表征。(2)将普伐他汀与功能化的金纳米颗粒进行荷载,构建“AuNPs-Pra”药物转运复合载体。并利用纳米粒度及电位分析仪、UV-Vis、红外光谱分别对该转运载体的粒径尺寸、表面电荷、药物搭载量、药物释放速率及连接基团进行表征。(3)通过CCK-8检测、Live-dead染色对药物复合转运载体的生物相容性进行评价,筛选出最佳浓度的药物转运载体以用于后续的实验研究。(4)因不同他汀类药物作用时间及浓度的不同,其心肌保护作用也有所差异。通过CCK-8、DHE染色确定普伐他汀最佳孵育浓度及时间,用于后续实验的对照组。(5)实验分为四组:空白对照组、金纳米颗粒组(AuNPs)、普伐他汀组(Pra)、药物复合载体转运组(AuNPs-Pra),分别对应加入适宜浓度材料孵育一定时间后,构建体外氧糖剥夺再灌注的心室肌细胞模型,DHE染色及WB检测评估各项处理组的细胞内抗氧化与抗凋亡水平。结果:(1)聚乙二醇(PEG)与金纳米颗粒最佳搭配质量比(W/W)为3:1以构建功能化的金纳米颗粒(F-AuNPs),颗粒表面所带为+7MV左右电位。(2)纳米粒度及电位分析仪测得裸金纳米颗粒粒径范围集中在为5-15nm,ζ电势为-12MV;F-AuNPs粒径范围集中在10-20nm左右,ζ电势为+7MV;“AuNPs-Pra”药物转运载体粒径范围集中于25-45nm左右,ζ电势为-6MV。UV-Vis测得的普伐他汀搭载量为56%,体外室温静置状态下释放,12小时即可达到药物释放平台期,持续释放48小时的累积药物释放速率为73.26%。红外光谱证实了F-AuNPs的成功构建,并显示出酰胺键的特征吸收峰,表明了聚乙二醇的氨基与普伐他汀的羧基间的缩合反应存在。(3)CCK-8及Live-dead检测药物复合载体浓度在0.05mmol/l时,对原代心室肌细胞增值无明显抑制作用及毒性,具有良好的生物相容性,差异无统计学意义。(4)CCK-8检测普伐他汀浓度及孵育时间对心肌细胞增值的影响,结果表明普伐他汀浓度在4u M及以下时,对心肌细胞增值无明显影响,差异无统计学意义。连续孵育24小时时,可抑制细胞增值,产生一定的毒副作用,差异具有统计学意义。DHE染色检测最佳抗氧化性的浓度及孵育时间表明,随着普伐他汀的浓度越高,孵育的时间越长,其抗氧化性作用越好。综合CCK-8检测与DHE染色情况,选取4u M连续孵育12小时作为后续对照组普伐他汀孵育的浓度及时间。(5)设立一组单纯缺氧复氧细胞模型的空白对照组,三组不同材料的实验组,连续孵育一定时间后,建立体外的氧糖剥夺再灌注模型。DHE染色表明,AuNPs及Pra均可显著降低复氧后细胞内ROS水平,而“AuNPs-Pra”药物复合载体组的抗氧化性要优于单独材料应用组,差异具有统计学意义。WB检测结果再次证实“AuNPs-Pra”组抗氧化性优于单独的材料处理组,进一步检测的细胞内Capase-3表达水平显示“AuNPs-Pra”相较于单一材料处理组,具有优越的抗凋亡水平。结论:(1)聚乙二醇与金纳米颗粒质量比(W/W)为3:1时,功能化金颗粒能最大化的荷载上普伐他汀。(2)电位分析仪及红外光谱表征表明普伐他汀的荷载可能是通过静电吸附与化学键连接共同作用。“AuNPs-Pra”药物复合转运载体中普伐他汀搭载量为56%,12小时可达到药物释放的平台期,48小时的累积药物释放速率为73.26%。(3)相较于单一材料作用而言,“AuNPs-Pra”这一复合材料的抗氧化性及抗凋亡水平最好,差异具有统计学意义。