论文部分内容阅读
水剂法作为新型的制油技术,具有耗能低、产品质量好的优点,但是在生产过程中会产生大量由蛋白质稳定的乳状液,严重影响油脂得率,成为水剂法工业化应用的“瓶颈”。本文以水剂法提取花生油的过程中产生的乳状液为研究对象,首先对花生乳状液界面吸附蛋白的提取工艺进行研究,并分析其乳化性质;然后通过Sepharose CL-6B凝胶过滤层析和RP-HPLC进一步分离界面吸附蛋白,研究了各蛋白组分的乳化和结构性质。通过单因素试验确定水洗后乳状液的最佳除油工艺条件:当Tween-20添加量1.5%、搅拌时间60 min、离心力20500 g时,水洗后乳状液除油率最高达到75.21%。乳状液除油后得到的界面吸附蛋白粗提液,经过透析、硫酸铵盐析、G15层析和酸沉等方式处理,得到不同的界面吸附蛋白样品,比较各样品蛋白质纯度,发现酸沉得到的界面吸附蛋白纯度最高,达到64.68%。与花生分离蛋白、菜籽分离蛋白以及大豆分离蛋白相比,花生界面吸附蛋白的溶解性较差,但乳化活性最高,表现出的乳化稳定性也很好,降低油水界面张力的速率最快。DSC实验结果表明界面吸附蛋白分子已经展开。优化了Sepharose CL-6B分离界面吸附蛋白的条件,发现当界面吸附蛋白上样量为300 mg、洗脱速度为40 mL/h时,分离效果最好,能够得到G1、G2和G3三个主要组分。其中G3组分的乳化性最好,形成的乳状液中油滴粒径最小(1.62μm),降低界面张力的速率也最快。G3组分中二硫键含量和表面疏水性均显著高于花生分离蛋白、界面吸附蛋白、G1和G2组分,其中二硫键含量达到36.24μmol/g,表面疏水性为270.31;内源荧光光谱分析表明G3组分的分子结构更加舒展;傅立叶红外光谱分析表明G3组分中β-折叠和无规则卷曲结构较多,β-转角结构较少。采用半制备RP-HPLC进一步分离纯化G3组分,可以得到G3-R1、G3-R2和G3-R3三个主要组分,其中G3-R3降低界面张力的速率最快。