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目的:通过检测NDRG1在胰腺癌组织中的表达、细胞生物学和分子生物学研究,探讨NDRG1对胰腺癌细胞生长增殖、细胞凋亡、侵袭转移的影响及其机制。方法:1)通过RT-PCR、Western Blot方法检测NDRG1在胰腺癌组织、癌旁组织和胰腺癌细胞株中的mRNA和蛋白的表达情况。2)设计引物,以胰腺癌细胞的cDNA为模板扩增NDRG1基因CDS区,设计合成NDRG1基因特异性表达的shRNA序列,以逆转录病毒载体pMSCV-puro/pSIREN-RetroQ为基础构建NDRG1过表达质粒及沉默质粒。包装生成逆转录病毒并转染胰腺癌细胞株,嘌呤霉素筛选稳定过表达和沉默的重组载体的胰腺癌细胞株。RT-PCR和Western Blot验证稳定转染的过表达和沉默细胞株。3)通过细胞划痕实验、细胞迁移实验和细胞侵袭实验评估细胞迁移侵袭能力,检测细胞侵袭能力。通过CCK-8检测细胞增殖能力,PI染色法分析细胞周期,Annexin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡。Western Blot 检测 STAT3,MMP-2,MMP-9,PTEN,p-AKT,Caspase3 表达情况,探索干扰 NDRG1 对 STAT3 信号通路的调控作用。结果:1)NDRG1在胰腺癌组织和癌旁组织的mRNA表达均有差异,12例胰腺癌组织中NDRG1 mRNA水平比癌旁组织中的表达明显降低。Western Blot结果显示NDRG1蛋白在12例胰腺癌组织中的表达明显低于癌旁组织。在10株胰腺癌细胞株中NDRG1 mRNA和蛋白表达存在差异,在MIA PaCa2和PANC-1中的表达较低,故选择它们作为后续实验研究对象。2)设计和构建了 NDRG1基因特异性过表达和沉默质粒,并包装逆转录病毒,成功感染MIA Paca2和PANC-1胰腺癌细胞株,用嘌呤霉素成功筛选获得NDRG1稳定过表达和沉默的细胞株。经过RT-PCR和Western Blot验证NDRG1在过表达细胞中稳定高表达,在沉默细胞中表达被稳定抑制,说明构建成功,可作为后续研究的细胞株。3)通过细胞划痕实验、迁移实验和侵袭实验发现,NDRG1过表达的MIAPaCa2和PANC-1细胞迁移能力明显减弱,沉默NDRG1表达的MIAPaCa2和PANC-1细胞迁移能力显著增强。NDRG1过表达的MIAPaCa2和PANC-1细胞中,穿过Transwell小室的细胞数较对照组明显减少,而在NDRG1沉默细胞组中较对照组细胞穿过数目显著增加。CCK-8检测细胞增殖发现在NDRG1过表达的MIA PaCa2和PANC-1细胞中,细胞数明显小于对照组,在NDRG沉默细胞中较对照组显著升高。过表达NDRG1的PANC-1细胞周期中S期中增多,在MIAPaCa2中未见改变。过表达NDRG1后MIAPaCa2细胞凋亡增加。过表达NDRG1胰腺癌细胞中 STAT3、MMP-2、MMP-9,p-AKT 表达下调,PTEN、Caspase3 表达上调。而抑制NDRG1表达后STAT3、MMP-2、MMP-9、p-AKT表达上调,PTEN、Caspase3表达下调。结论:1)NDRG1在胰腺癌中是一类抑癌基因,其低表达可能与胰腺癌的低分化、高侵袭力有关。NDRG1在胰腺癌中的表达与胰腺癌细胞的分化程度、转移能力可能有关。2)成功建立了稳定的过表达和沉默的NDRG1胰腺癌细胞株,为后续研究NDRG1对胰腺癌生物学行为影响的体外实验和机制研究做好了准备。3)NDRG1过表达可诱导胰腺癌细胞凋亡、抑制细胞侵袭转移和增殖能力,沉默NDRG1表达可促进胰腺癌细胞侵袭转移和增殖能力。4)NDRG1可能通过影响STAT3信号通路而下调MMP-2和MMP-9表达从而抑制胰腺癌侵袭转移,NDRG1也可能通过调控PTEN、p-AKT和Caspase3的表达抑制胰腺癌细胞的增殖和诱导细胞凋亡,在胰腺癌的发生和发展中起重要作用。