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本研究旨在探索乙肝病毒表面抗原/截短型 HCV 核心蛋白融合基因在植物中表达乙肝丙肝双价抗原的可能性,以期为进一步研制植物乙肝丙肝双价口服疫苗打下基础。
应用重组PCR技术将乙肝病毒(HBV)s基因连接在丙肝病毒(HCV)截短型核心蛋白序列的5’端,=者通过柔性肽(Gly<,4>Ser)<,2>序列相连,构建成融合基因BC,测序结果正确。
将融合基因 BC 克隆到植物双元表达载体pBin438上,获得DBin438BC,然后用冻融法将其转入根癌农杆菌EHA105中,侵染丽春番茄子叶和下胚轴,经预培养、共培养、脱菌培养、筛选培养、生根培养获得了 9 株抗卡那霉素的番茄植株。提取抗性植株基因组DNA,进行PCR及 PCR-Southern检测,5株获得阳性信号。初步表明目的基因已整合到了番茄基因组中。