荔枝核总黄酮对大鼠肝星状细胞增殖的抑制作用及对蛋白TGF-β1和α-SMA表达的影响

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目的:研究荔枝核总黄酮(litchi flavonoids TFL)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖抑制作用及其可能的作用机制。  方法:应用药物 TFL对生长状态稳定的大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)进行处理(20mg/ml、40 mg/ml、80 mg/ml、160 mg/ml4个浓度,并设置空白对照组),MTT法检测TFL对HSC-T6细胞增殖的抑制活性,并根据抑制率计算样品对细胞增殖的半数抑制质量浓度(IC50);吖啶橙染色观察细胞凋亡;流式细胞术检测经不同浓度TFL处理后HSC-T6细胞周期的变化情况。Western Blot检测经不同浓度TFL处理后HSC-T6细胞中TGF-β1(transforming growth factor-β1)和а-SMA(α-smooth muscle actin)蛋白表达水平的改变。  结果:MTT检测结果显示,TFL对HSC-T6具有增殖抑制活性(P<0.05),其半数抑制浓度(IC50)为101.98mg/ml。吖啶橙染色显示,药物组细胞中出现核浓缩、核碎裂及致密浓染亮绿色凋亡小体。流式细胞仪检测结果显示,对照组细胞 Gl期细胞比例为47.68±2.92%, G2期为19.58±2.93%,S期为32.75±2.09%;TFL药物处理组细胞G1期细胞数量增加,而G2期细胞显著减少,与对照组比较,P<0.05。Western Blot检测结果显示,细胞中TGF-β1和а-SMA蛋白表达,随药物浓度增加,其表达呈下降趋势,与对照组相比,100mg/ml及120mg/ml药物浓度组的TGF-β1和а-SMA蛋白表达明显降低,P<0.05。  结论:TFL在体外对大鼠肝星状细胞HSC-T6的增殖具有抑制作用,其作用机制可能通过抑制细胞TGF-β1和а-SMA蛋白表达,达到阻滞细胞增殖周期和诱导细胞凋亡,从而达到抗纤维化的作用。
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