研究背景寻常型银屑病是一种免疫相关的慢性炎症性疾病,目前银屑病在我国的患病率为0.47%。因其病情慢性和极易复发的特性,目前尚无根治方法。究其原因,系该病的致病机制尚不完全明确,限制了有效治疗手段的探索开发。因此,加强对寻常银屑病的发生机制及防治措施的研究具有重大的理论价值和社会意义。肿瘤坏死因子 alpha 诱导蛋白 3（tumor necrosis factor alpha-induced protein 3,TNFAIP3）,又称锌指蛋白A20,是一种广泛诱导性表达于胞浆中的蛋白,可能通过NF-κB信号通路发挥负性调解作用。TNFAIP3在多种免疫细胞的分化与功能中发挥重要作用,包括B细胞、T细胞、树突状细胞、巨噬细胞。在银屑病领域,目前研究认为TNFAIP3基因多态性与银屑病的严重程度相关,并与肿瘤坏死因子α（Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α）抑制剂治疗银屑病的疗效有关。既往研究报道TNFAIP3在银屑病皮损中表达水平与对照组相比有所差异,但研究结果不一。而TNFAIP3在银屑病外周血淋巴细胞中的表达情况以及发挥的作用机制目前尚不清楚。因此,本研究拟从临床标本以及银屑病小鼠模型的角度出发,从不同层次来研究TNFAIP3在寻常型银屑病发病机制中的作用,以及其是否参与TNF-α抑制剂的抗银屑病治疗反应。对象1.选取2019年4月至2019年6月就诊于北京协和医院皮肤科门诊经临床或病理确诊的23例PASI评分大于10的中重度寻常型银屑病患者及25名健康对照组被试。2.选取7-8周龄,体重20±2g,雄性Bab/c小鼠背部剃毛。将小鼠随机分成4组（每组小鼠6-8只）,对照组:外用凡士林软膏6天;外用咪喹莫特（Imiquimod,IMQ）组:连续涂抹咪喹莫特6天;IMQ+对照抗体组:连续涂抹咪喹莫特6天,并于第0天和第3天腹腔注射200 μ g鼠IgG rat对照抗体;IMQ+TNF-α抑制剂组:连续涂抹咪喹莫特6天,并于第0天和第3天腹腔注射200ug鼠TNF-α抑制剂。在实验第7天分别取小鼠血清,外周血PBMC,皮损,脾脏进行检测。方法1.应用RT-PCR方法分别测定中重度寻常型银屑病患者组和健康对照组外周血单个核细胞（Peripheral mononuclear blood cell,PBMC）中 TNFAIP3 mRNA 的相对表达量。2.采用咪喹莫特乳膏建立小鼠银屑病模型,对照组涂抹凡士林乳膏。3.观察4组小鼠皮肤改变,记录改良银屑病皮损面积及严重程度指数（Psoriasis Area and Severity Index,PASI）评分。4.苏木精-伊红（Hematoxylin-eosin,HE）染色观察四组小鼠皮肤病理改变。5.应用RT-PCR方法分别测定四组小鼠外周血PBMC中TNFAIP3 mRNA的相对表达量。6.酶联免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA）测定四组小鼠血清中细胞因子在组间水平差异。7.应用流式细胞术检测对照组和银屑病小鼠中脾脏细胞中Th1和Th17细胞的比例。8.应用ELISA法测定四组小鼠血清中JNK、ERK1/2、P38的磷酸化水平。结果1.中重度寻常型银屑病患者外周血PBMC的TNFAIP3 mRNA表达水平较正常对照组显著降低（P<0.01）。2.咪喹莫特诱导的小鼠银屑病模型建立成功,银屑病治疗药物TNF-α抑制剂能抑制小鼠银屑病样皮炎的发生发展以及抑制银屑病小鼠皮损组织中角质形成细胞异常增殖和炎症细胞浸润。3.咪喹莫特诱导的小鼠银屑病组外周血PBMC中TNFAIP3 mRNA的表达水平明显低于对照组小鼠,而TNF-α抑制剂可以上调小鼠外周血PBMC中TNFAIP3的表达量。4.咪喹莫特诱导的小鼠银屑病组外周血中Th1和Th17细胞因子的表达显著上升,银屑病小鼠脾脏中Th1和Th17细胞的比例也明显上升;TNF-α抑制剂可下调小鼠血清中Th1和Th17细胞因子的表达量。5.咪喹莫特诱导的银屑病病小鼠外周血磷酸化p38水平较对照组明显升高,而TNF-α抑制剂可抑制p38 MAPK通路的激活。结论1.TNFAIP3在中重度寻常型银屑病患者外周血PBMC以及银屑病小鼠外周血PBMC中均呈低表达,其与银屑病的发生发展密切相关。2.银屑病小鼠外周血PBMC中TNFAIP3的低表达伴随着Th1,Th17细胞及其相关细胞因子的升高和p38信号通路激活,表明TNFAIP3在银屑病的调节作用与T细胞亚群分化和p38信号通路有关。3.TNF-α抑制剂可能通过上调TNFAIP3,抑制Th1/Th17亚群分化和p38信号通路激活,从而干预咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮炎。