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研究目的:分析血管紧张素Ⅱ1型受体(Angiotensin Ⅱ type 1 receptor blocker,AT1R)表达量与结肠癌5年生存率之间的关系。检测AT1R在结肠癌细胞系CT26中的表达。探讨血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)及氯沙坦对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭等生物功能学的影响,进一步探究血管紧张素Ⅱ及氯沙坦与结肠癌细胞上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)之间的关系及具体分子机制。研究方法:使用生物信息数据库分析结肠癌患者5年生存率与AT1R蛋白的表达量与之间的关系。使用免疫荧光、蛋白质免疫印迹(Western Blot)方法检测AT1R蛋白在CT26结肠癌细胞中的表达。用CCK-8实验和成克隆实验检测血管紧张素Ⅱ及氯沙坦对CT26结肠癌细胞增殖的影响,细胞划痕实验和Transwell迁移实验检测血管紧张素Ⅱ及氯沙坦对CT26结肠癌细胞迁移能力的影响,Transwell侵袭实验检测CT26结肠癌细胞的侵袭能力。蛋白质免疫印迹实验检测血管紧张素Ⅱ及氯沙坦对MMP2和MMP9等肿瘤侵袭相关蛋白表达量的影响。蛋白质免疫印迹实验检测上皮间质转化相关指标E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、α-肌动蛋白和锌指转录因子(Snail)的蛋白水平的变化,以及TGF-β/Smad通路的相关指标TGF-β、Smad2、p-Smad2的蛋白表达量的变化。初步探明血管紧张素Ⅱ促进EMT的分子机制。体内实验检测氯沙坦对结肠癌生长的影响。研究结果:数据库结果显示,AT1R蛋白低表达的结肠癌患者5年生存率较AT1R蛋白高表达的结肠癌患者5年生存率高。AT1R蛋白表达于CT26细胞膜上,血管紧张素Ⅱ可以上调AT1R蛋白的表达,可以增强结肠癌细胞的增殖和克隆形成能力、促进肿瘤迁移及侵袭(P<0.05),上调MMP2、MMP9以及间质标志物N-钙黏蛋白、α-SMA和Snail蛋白表达水平,下调上皮标志物E-钙黏蛋白表达水平;上调TGF-β/Smad通路中TGF-β、pSmad2蛋白的表达水平(P<0.05),总的Smad2蛋白水平无明显变化。而用氯沙坦预处理结肠癌细胞后,结肠癌细胞的增殖和克隆形成降低、迁移及侵袭能力均减弱(P<0.05),MMP2、MMP9以及间质标志相关蛋白N-钙黏蛋白、Snail和α-SMA的表达水平下降,上皮标志物E-钙黏蛋白的表达水平升高;TGF-β/Smad通路中的TGF-β、p-Smad2蛋白水平下降(P<0.05),总的Smad2蛋白水平无明显变化。在动物实验中,结果显示,氯沙坦显著抑制了结肠癌肿瘤体积和肿瘤重量的增加(P<0.05)。研究结论:低表达AT1R蛋白的结肠癌患者较高表达AT1R蛋白的结肠癌患者5年生存率高。血管紧张素Ⅱ增强结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力;通过TGF-β/Smad通路促进结肠癌细胞的上皮间质转化。而氯沙坦可以抑制由血管紧张素Ⅱ介导的结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭,且抑制TGF-β/Smad通路的活化,抑制结肠癌细胞的上皮间质转化。在结肠癌小鼠模型中,氯沙坦可以显著抑制小鼠结肠癌的生长。本研究结果提示AT1R可能成为结肠癌患者新的分子靶向治疗位点或药理学位点。