目的：探讨CDC25B基因的各剪切体在四种胰腺癌细胞株中的表达，构建并转染真核表达载体pcDNA3.1-CDC2583重组质粒，为阐明CDC25B在胰腺癌发生发展中作用机制提供实验基础。 方法：应用RT-PCR检测Panc-1、SW-1990、 Bxpc-3和CFPAC-1细胞株中的CDC25B的各剪切体mRNA表达水平，并应用Western blot检测CDC25B的蛋白在以上胰腺癌细胞株中表达水平。将获得的目的基因片段(CDC2581、CDC2582、CDC2583的CDS区)克隆于pcDNA3.1/(+)载体上，待测序鉴定后，脂质体转染至低表达CDC25B胰腺癌细胞系SW-1990，用G418筛选后进行RT-PCR和Western blot鉴定。 结果：RT-PCR结果提示在Panc-1中CDC2581与CDC2582的表达强度较高；CDC2582在CFPAC-1和SW-1990中表达较高；CDC2581在Bxpc-3中的表达较高；CDC2583在四种胰腺癌细胞株中表达均较低。Western blot结果提示CDC25B蛋白在Panc-1和CFPAC-1表达水平较高，SW-1990的表达强度中等，Bxpc-3弱表达或不表达CDC25B蛋白；经测序鉴定后构建的重组质粒中含有CDC25B1、CDC25B2及CDC25B3的CDS区，经pcDNA3.1-CDC25B3转染的SW-1990细胞稳定表达CDC25B3蛋白。 结论：CDC25B1和CDC25B2在四种胰腺癌细胞株中表达水平较高，而CDC25B3在胰腺癌细胞株中表达较低。本研究构建稳定表达CDC25B3的胰腺癌细胞株SW-1990，为阐明CDC25B家族在胰腺癌发生发展中的作用提供实验基础。