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世界范围内，大约有35亿慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染者。其中每年只有1％到2％的患者表面抗原(hepatitis B surface antifen，HBsAg)可以自然清除。最终将有近50％患者死于肝癌或肝衰竭。病毒以及患者本身因素如年龄、免疫力和性别都会影响疾病的发展。 亚洲国家，迄今为止绝大多数的慢乙肝患者都是通过母婴传播的方式被e抗原(hepatitis B e antigen，HBeAg)阳性的母亲传染。在几到十几岁期间一般都是e抗原阳性，但有部分患者e抗原转阴同时伴随谷丙转氨酶(alanine transaminase，ALT)升高，而另一部分患者仍未e抗原阳性。另外有些患者e抗原转阴后，ALT仍维持在高水平。最近e抗原阳性和阴性的分子生物学基础得到深入研究。基因变异与e抗原及病毒复制的关系被广泛研究。HBV前Cnt83(基因组nt1896)的G→A(A83)点突变，使AA28由色氨酸(TGG)变异为中止密码子(TAG)。从而不能形成HBeAg的前体蛋白，HBeAg分泌停止，血清HBeAg转阴。核心基本启动子(Bcp)上的双变异nt1762的A→T和nt1764的G→A是慢性感染中另一较为常见的变异组合。HBV的Bcp控制前C和C RNA的转录，前C RNA编码分泌HBeAg，变异后的毒株降低C RNA的转录，最终使HBeAg的表达减少。但前C及Bcp的点突变对于临床及病毒学的重要性尚不充分了解。中文摘要 现在按不同毒株全基因序列之间的差异)8%为标准，乙肝病毒分为A.B.C.D.E.F.G7个基因型。基因型B和C常见于亚洲而A和D常见于西方国家。基因型E只限于非洲，F流行于中美洲。基因型G最近才发现所以分布情况还不清楚。皿然有很多关于基因型的研究，但其临床重要性如对于疾病发展及治疗的影响迄今尚有很大争议。 在乙型肝炎发展的不同阶段血清病毒含量都有显著的变化，并与病情轻重及预后有着密切关系。而且在拉米夫定等抗病毒药物治疗下，病毒含量液会有很大变化。因此在临床上迫切需要有一种能定量检测病毒含量且又灵敏性高的检测方法。当前用于血清HBV DNA定量检测方法很多:分支DNA链(b一DN助信号放大方法:以转录为媒介的扩增方法(TMA);基于PCR的扩增方法等。虽然基于PCR的扩增方法灵敏性很高，但其费用昂贵、过程复杂、易污染等特性使它很难在临床广泛应用。因之我们实验室近来建立了两种敏感性很高的化学发光酶联免疫(ehemi lumineseenee enzymeinununoassays，CLEIA)方法。一种是核相关抗原(HBcrAg)检测法，利用单核抗体同时检测血清e抗原和核心抗原水平。另一种方法是只检测血清核心抗原水平。对日本患者的调查研究查明这两种检测方法是监测肝炎患者的方法，有很好的临床应用价值。但迄今尚无应用于对基因型B的患者进行研究。 第一部分:石家庄市慢性乙型肝炎患者中不同基因型分布情况的研究 目的是研究石家庄市慢性乙型肝炎患者中不同基因型分布情况以及基因型对于慢乙肝患者的临床及病毒学的影响。 193例慢乙肝患者的血清标本(男性125名，女性89名， 2中文摘要年龄5一73岁)于2001年8，9月收集于河北肝病医院。患者表面杭原均为阳性，持续至少6个月，丙肝抗体阴性。木研究在S基因PCR扩增基础上采用限制性片段长度多态性分析(RFLP)方法对石家庄市慢乙肝患者进行了基因分型。 193名患者中，169名(87.6%)I感染了HBV的基因型C (HBV/C)，21名(1 0 .9%)感染了HBV的基因型B(HBV/B)，3名(1.50/0)感染了基因型A(HBV/A)。基因型B患者和基因型C患者相比较，在年龄(平均22:27 years)，性别(男57.ly0:65.7%)，ALT(50:47U/L)，HBeAg(6.3:5.7 LogU/mL)和HBcAg(8 .3:8.0 Logu/mL)方面都无统计学显著性差别 (p<0.05)。基因型B患者的血清DNA水平高于基因型C.虽无统计学显著性差别(p=0 .09)。 结果表石家庄市慢乙肝以基因型C和基因型B为主，且基因型B和一IC患者之间在临床特征上无显著差别。 第二部分:核抗原及核相关抗原的检测及其临床意义 本研究I:l的在于评价在我国基因型B和C患者中使少!J化学发光酶联免疫(ehemi lumineSCence enZymeimmunoaSSayS，CLEIA)方法检测核相关抗原(HBcrAg)和核抗原HBcAg)的临床应用价值。 本研究包括21名基因型B患者，169名基因C患者。和抗原于核相关抗原使用化学发光酶联免疫CLE工A)方法检测。 在基因型B于C患者中，血清核相关抗原(HBcrAg)浓度和血清DNA水平都具有密切正相线性相关关系 (r=0.786，p<0.001;r=0.565，p<0.001);同时在基因型B于C患者中，血清核抗原(HBcAg)和血清DNA水平也有密切正相线性相关关系(r=0.772，p<0.001:r=0.598，p<0.001)一抗 3中文摘要原阳性患者的HBerAg/HBeAg比值(median1.9，range:0.9一4.1)显著高于e抗原阴性患者的比值(medianl·6，range:0.3一0.5)(p(0.001). 本研究表明HBcAg于HBCrAg方法有很好临床应用性，两者结合更有利于慢乙肝的临床分析。 第三部分:前C及C基因突变检测与临床意义 本实验目的在于讨论我国石家庄市慢乙肝前C及C基因突变的?