高脂饮食对不同年龄小鼠脂肪组织炎症的影响

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背景肥胖是一种以慢性低水平的局部炎症为主要特征的代谢性疾病。肥胖与动脉粥样硬化、2型糖尿病、脂肪肝、哮喘等疾病的发生发展密切相关。肥胖受到遗传、运动、饮食、年龄等影响,其中随着社会的发展和人们物质生活水平的提高,高脂肪饮食成为肥胖非常重要的诱发因素。高脂肪饮食可导致体重的增加,脂肪细胞体积的增大,脂肪组织中炎症性免疫细胞的增加以及炎症性细胞因子的增多,而脂肪组织炎症的增加可降低胰岛素的敏感性,从而导致2型糖尿病的发生,因此高脂饮食诱导的脂肪组织炎症对于疾病的发生发展至关重要。而高脂饮食对脂肪组织炎症的影响还受到年龄的影响,据报道孕期小鼠高脂饮食会增加其后代患2型糖尿病的几率并使其后代脂肪组织炎症增加。而高脂饮食对不同年龄阶段小鼠的脂肪组织炎症的影响是否有差别目前尚不清楚。目的通过给予幼年小鼠和成年小鼠相同时间的高脂饮食,探究其对不同年龄阶段小鼠脂肪组织炎症的影响方法1.动物模型的建立:将3周龄C57BL/6品系的小鼠(幼年鼠)分为两组,一组给予正常饮食14周,一组给予高脂肪饮食14周;将12周龄C57BL/6品系的小鼠(成年鼠)分为两组,一组给予正常饮食14周,一组给予高脂肪饮食14周。2.体重变化趋势的检测:在小鼠进行高脂肪饮食的第0周开始,每隔一周称重一次并记录。3.代谢指标的检测:四组小鼠在高脂或正常饮食14周后,分别检测其空腹血糖,葡萄糖耐糖量以及胰岛素耐受量测定。4.组织化学检测脂肪细胞大小:四组小鼠在正常或高脂饮食14周后,对其附睾脂肪组织,皮下脂肪组织,肾周脂肪组织进行H&E染色,并计算其脂肪细胞平均面积。5. qPCR检测附睾脂肪组织中炎症性细胞因子的变化。6.流式细胞术检测炎症性免疫细胞:剪碎小鼠附睾脂肪组织,胶原酶消化后过滤,用荧光抗体染色后检测CD8+T淋巴细胞和CD4+T细胞所占的比例及每克中的数量。7.组织化学检测肝脏脂滴累积情况:四组小鼠在正常或高脂饮食14周后,对其肝脏进行H&E染色及油红O染色。结果探究高脂肪饮食对不同年龄阶段小鼠脂肪组织炎症的影响。1.体重变化趋势及脂肪组织组织化学结果显示,成年小鼠较幼年小鼠对高脂肪饮食敏感,并且具有较大附睾、皮下、肾周脂肪细胞的体积。2.在经历相同时期高脂饮食后,幼年鼠具有更加严重的附睾脂肪组织炎症。3.与成年鼠相比,幼年鼠在高脂诱导下可浸润有更多的CD8+T淋巴细胞4.葡萄糖耐受量结果显示,与幼年鼠相比,高脂肪饮食可诱导成年鼠的耐糖量降低地更加明显。5.油红O染色结果显示,高脂饮食的成年鼠和幼年鼠肝脏具有相似程度的脂肪变性。结论与成年鼠相比,高脂饮食条件下的幼年鼠脂肪组织炎症更严重。
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