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第一部分通光散总苷和总苷元的化学成分分离鉴定研究背景和目的通光散(Marsdenia tenacissima)是萝蘑科(Asclepiadaceae)牛奶菜属植物,又名乌骨藤、通关藤。民间多用于治疗肿瘤等疾病。国内已有以通光散为原料的中药注射剂“消癌平”用作治疗肿瘤的商品药物。通光散的化学成分迄今已有较多报道,C21甾体类物质是其主要的生理活性物质。本课题组在国际上首次报道了其中具有逆转肿瘤多药耐药(MDR)作用、有助于耐药肿瘤治疗的C21甾体活性成分；同时发现了具有增效肿瘤化疗药物体内外活性的有效部位。通光散及其提取物中哪些化合物具有确切的体内外抗肿瘤活性,或者体内外增效肿瘤化疗药物的作用?亟待研究阐明。为此,我们继续对通光散进行化学成分的分离纯化鉴定,并通过肿瘤药物药理学研究确定是否具有相关抗肿瘤活性。本实验继续从该植物中分离鉴定其中的化学成分。方法通光散根茎乙醇提取物的乙酸乙酯萃取浸膏,即通光散总苷部位,乙酸乙酯浸膏弱酸水解即得通光散总苷元部位。这两个部位分别经过硅胶柱层析、RP-C18柱层析、Sephadex LH-20柱层析、HPLC进行分离纯化。运用光谱分析(UV、MS、1H-NMR、13C-NMR)进行结构鉴定。结果完成了12个化合物的分离和结构鉴定。结论这12个化合物的化学结构分别鉴定为：11α-O-2-Tigloyl-12β-O-acetyl-tenacigenin B(WGT-3),11α-O-2-Methylbutanoyl-12β-O-tigloyl-tenacigenin B(WGT-7),11α-O-2-Meth ylbutanoyl-12β-O-benzoyl-tenacigenin B(WGT-9),11α-O-2-Methylbutanoyl-12β-O-acetyl-tenacigenin B(WGT-11), tenacissoside H(WGT-12), marsdenoside A(WGT-13), marsdenosi de(WGT-17), tenacissoside G(WGT-18),11α,12β-di-O-Tigloyl-tenacigenin B(WGT-19), te nacigenin A(WGT-14), α-Methyl-pachybioside(WGT-15), Methy-β-D-theveropyranosyl-(1-4)-β-D-cymaropyranoside(WGT-16)。第二部分通光散总苷和总苷元的质量控制方法研究目的制备通光散总苷和总苷元,并研究其质量控制方法。方法采用HPLC-PDA检测法,选择WGT-3、-7、-9、-17、-18、-19作为对照品,对通光散总苷进行定性分析：选择WGT-3、-7、-9、-19作为对照品,对通光散总苷元进行定性分析；选择通光散总苷和总苷元共有的化合物11α-O-2-Tigloyl-12β-O-acetyl-tenacigenin B(WGT-3)作为定量分析指标,对该指标在通光散总苷和总苷元中的定量分析方法进行研究。结果建立了通光散有效部位化学组成的定性分析方法。以对照品的保留时间为依据,HPLC梯度洗脱为基本方法的定性分析图谱中,通光散总苷或总苷元的色谱峰获得了良好的分离,并且分别含有与对照品相一致的成分信号。通光散总苷的化学成分组成,以含有WGT-3、-7、-9、-17、-18、-19等6个tenacigenin B衍生物为特征,其中含WGT-3为0.74%；通光散总苷元的化学成分组成,以含有WGT-3、-7、-9、-19等4个tenacigenin B衍生物为特征,其中含WGT-3为11.9%。本论文为辨识两种活性提取物的化学成分组成特点提供了较为充分的技术依据。建立了通光散有效部位化学组成的定性定量分析方法。完成了共有成分WGT-3在两种提取物中的含量测定方法学研究与考查；测得通光散总苷和总苷元中WGT-3的含量分别为0.74%和11.9%。结论建立了通光散有效部位化学组成的定性定量分析方法。实验结果为通光散的质量控制提供了新的技术支持。