【摘 要】
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目的 ①探讨兔椎间盘髓核细胞凋亡及其调控基因;②观察外源性hTGF-β1基因对兔椎间盘髓核细胞凋亡及其调控基因的影响。 材料和方法 ①纯种成年新西兰大白兔15只,随机分为
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目的 ①探讨兔椎间盘髓核细胞凋亡及其调控基因;②观察外源性hTGF-β1基因对兔椎间盘髓核细胞凋亡及其调控基因的影响。 材料和方法 ①纯种成年新西兰大白兔15只,随机分为3组,每组5只,实验组采取腹部手术入路,暴露腰椎间盘,取本院骨科实验室构建的腺病毒为载体的Ad/CMV—hTGF-β1,其滴度为6×106pfu,20微升注射于腰3,4椎间盘髓核内;实验对照组手术方式同实验组,只是注射物质为磷酸盐缓冲液(PBS);正常对照组仅进行相应的外围手术操作,椎间盘未做任何处理。②手术后3周取出椎间盘,首先进行普通HE染色,观察髓核组织细胞形态;用免疫组织化学方法对各组椎间盘髓核组织细胞凋亡情况、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax进行染色观察;并用VIDAS图象分析系统进行半定量分析。 结果 普通HE染色结果显示3组椎间盘髓核组织形态基本相同;免疫组织化学染色显示,各组兔椎间盘髓核组织都有凋亡细胞出现,但实验组椎间盘髓核组织凋亡细胞明显少于其他两组,统计学显示差异有显著性;各组都可见髓核细胞内呈现Bcl-2和Bax蛋白阳性染色,但实验组椎间盘髓核组织内细胞Bcl-2蛋白阳性染色强于其他两组,而Bax蛋白阳性染色结果正好相反,统计学显示差异有显著性。 结论 腺病毒为载体的Ad/CMV-hTGF-β1转染兔椎间盘髓核细胞,通过促进Bcl-2蛋白的表达和抑制Bax蛋白的表达,能有效阻止椎间盘髓核细胞凋亡的发生。
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