随着兽药种类和数量的增多，药物残留问题亦备受关注，许多国家已建立了自己的检测体系。为提高兽药残留检测的时效性，不同类别兽药残留同时检测越来越符合社会发展的需求。目前国内外对这方面的研究也越来越广泛，然而多类兽药残留因各种药物具有不同的理化性质，这就为样品前处理和分离检测带来了很大的挑战。　　 本文建立了动物源性食品中包括糖皮质激素类、β-兴奋剂类、三苯甲烷类、硝基咪唑类、镇静剂类、雄性激素类、玉米赤霉醇类以及氯霉素等8类30多种兽药残留的液相色谱-电喷雾串联质谱（HPLC-ESI MS/MS）集成确证方法。方法采用MRM多反应监测、正负离子两种模式。其中正离子方法根据药物保留时间不同进行分段，提高了方法的灵敏度。样品加标后用甲醇/乙腈（体积比5/95）提取，冰水浴超声，正己烷除脂，旋转蒸发至干后用乙腈溶解，乙酸钠缓冲液定容，用HLB与MCX串联柱净化；残渣经酶解、甲醇提取后过Bond Elute Certify柱浓缩净化；合并洗脱液后旋蒸至干，定容。最后以Inertsil ODS-3 C18柱（3μm，100 mm×2．1 mm i．d．）为分离柱，正离子模式流动相为甲醇和5mM乙酸铵水溶液（含0．05％甲酸）（流速为200ml/min），负离子模式流动相为乙腈和水（流速为300ml/min），梯度洗脱，用液相色谱-串联质谱进行分析检测。实验中分别对柱温、梯度洗脱等色谱条件以及各种药物的质谱条件进行了优化：前处理对提取液及缓冲液pH值、定容液、浓缩方法以及净化方法等进行了优化，并分别对淋洗液和洗脱溶液的条件进行了优化。方法的线性范围为1．0～10．0μg/kg，加标回收率均在41．6～120％之间，方法相对标准偏差介于2．0～15．2％。　　 实验结果表明所建立的方法具有分析速度快、灵敏度高和特异性好等特点。本实验首次只针对禁用药物进行了检测，并且种类之多也在国内外目前没有报道。方法的定量限完全达到了国际上对禁用药物的检测要求，作为日常检测方法达到了缩短检验周期、降低检测成本的目的。