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第一部分壳聚糖修饰的多粘菌素B脂质体及脂质微泡的制备及性能检测目的制备微泡及壳聚糖修饰的多粘菌素B脂质体,并测定其一般特性。方法采用注入法制备壳聚糖修饰的多粘菌素B脂质体(c-PMB-Lip),并观察其形态,检测其粒径、电位、包封率、载药量及体外释放率等一般特性;采用机械震荡法制备脂质微泡(MB),并检测粒径、电位及其形态分布;随后通过静电吸附法制备微泡-壳聚糖修饰的多粘菌素B脂质体耦联体(MB-c-PMB-Lip),并用荧光显微镜检测其连接情况。结果制备的c-PMB-Lip粒径分布均匀,平均粒径为(215.2±5.03)nm,Zeta电位为(12.64±1.44)m V,包封率为(90.31±2.84)%,载药量为(15.62±1.97)%,且在24h内能够完全释放出抗菌药物,具有一定的缓释作用;MB粒径为(4.54±0.8)μm,电位为(-2.42±0.43)m V。荧光显微镜观察两者连接情况显示制备的携带正电电荷的载药脂质体均匀的分布在带负电的脂质微泡周围,形成带有红色荧光的花环样结构。结论本实验成功的制备了壳聚糖修饰的多粘菌素B脂质体,并将其与脂质微泡相连接,形成微泡-载药脂质体耦联体。荧光显微镜观察得出该耦联体粒径分布均匀,结合率高,提示其可作为体内外实验的药物研究基础。第二部分超声微泡联合壳聚糖修饰的多粘菌素B脂质体对生物膜态鲍曼不动杆菌的体外抗菌实验研究目的探究超声微泡联合壳聚糖修饰的多粘菌素B脂质体对生物膜态鲍曼不动杆菌的协同抗菌作用;探讨二者联合对细菌生物膜结构的影响。方法采用96孔板法培养细菌生物膜,微量肉汤稀释法测定不同多粘菌素制剂对临床分离鲍曼不动杆菌(AB)的最小生物膜抑制浓度(MBIC);采用结晶紫染色法及Alamar Blue法分别评价壳聚糖修饰的多粘菌素B脂质体组(c-PMB-Lip)、超声微泡+多粘菌素B组(USMB+PMB)、超声微泡+壳聚糖修饰的多粘菌素B脂质体组(USMB+c-PMB-Lip)对生物膜态AB的抗菌作用,并分析其抗菌效应的量效关系;采用24孔板法培养细菌生物膜,通过扫描电镜评价不同制剂对AB生物膜结构的影响。结果c-PMB-Lip对生物膜态AB的MBIC为(8.0±2.0)μg·m L-1;超声微泡能增强抗菌药物多黏菌素B对生物膜态AB的抑制作用;而超声微泡联合脂质体制剂可得到更为显著的抗生物膜态AB效应,甚至可以完全清除生物膜态AB;各组随着药物浓度的增加,在一定范围内与其抗菌作用呈现量效关系;同无菌空白对照组相比,USMB+c-PMB-Lip在2μg/m L时几乎能够完全清除细菌生物膜并达到最大抗菌效应(P>0.05);扫描电镜显示经超声微泡处理后AB生物膜表面形成由空化作用导致的散在小孔;多粘菌素B处理后仍可见大量生物膜结构,USMB+c-PMB-Lip处理后,生物膜清除十分明显,仅存散在个别细菌。结论超声微泡联合壳聚糖修饰的多黏菌素B脂质体对生物膜态AB具有显著的协同抗菌作用。