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目的:观察肿瘤转移相关标志物[细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、结缔组织生长因子(CTGF)和血管内皮生长因子(VEGF)]在食管鳞癌(ESCC)组织中的表达,分析其表达与ESCC临床病理特征及预后的关系,探讨上述分子对ESCC的分子分型价值。
方法:应用实时荧光定量PCR法和免疫组织化学法分别检测33例食管鳞癌标本及相应癌旁组织(33例)中的CyclinD1、CTGF、VEGFmRNA和蛋白水平的表达,运用spearman秩相关观察上述三个因子mRNA和蛋白水平表达的相关性;另选2008-2009年间100例有临床随访资料的ESCC术后患者组织和20例正常食管黏膜组织,免疫组织化学检测CyclinD1、CTGF和VEGF的表达,应用Kaplan-Meier生存曲线和Cox回归模型分析其表达与临床病理因素及患者预后的关系,并将其表达特征与TNM分期比较。
结果:在CyclinD1、CTGF和VEGF研究表达特征组:与癌旁组织相比,在mRNA和蛋白水平,ESCC组织中CyclinD1、CTGF、VEGF表达均增加,差异有统计学意义(P<0.05);并且在ESCC组织中,三者的mRNA水平及蛋白水平的表达成正相关(P<0.05)。在观察CyclinD1、CTGF和VEGF临床病理、分子分型组:CyclinD1、CTGF、VEGF蛋白在有淋巴结转移的ESCC患者中阳性率(73%、64%、67%)明显高于无淋巴结转移者(51%、44%、35%;P<0.05),说明上述三个标志物高表达可能有促进ESCC淋巴结转移的作用;并且在有淋巴结转移的ESCC患者中,CyclinD1、CTGF和VEGF表达成正相关(P值均<0.05)。单因素生存分析表明:TNM分期、淋巴结转移、远处转移、CyclinD1、CTGF和VEGF表达水平与生存相关,差异均有统计学意义(P<0.05)。Cox模型多因素分析表明:ESCC组织中CyclinD1和VEGF表达水平、淋巴结转移和远处转移是影响ESCC患者预后的独立因素(P=0.001,0.017,0.042,0.003)。通过对上述三个标志物表达程度与TNM分期比较发现,在Ⅰ期及Ⅳ期ESCC中,CyelinD1、CTGF及VEGF的高表达者3年生存率要差于低表达者(P值均<0.05)。
结论:ESCC中CyclinD1、CTGF、VEGFmRNA和蛋白水平表达均增高,是明显区别于正常食管黏膜的分子特征,并且在ESCC组织中还发现CyclinD1、CTGF、VEGF其表达水平在mRNA与蛋白相一致(P<0.05);CyclinD1、CTGF和VEGF高表达提示ESCC有较高的淋巴结转移率,即这些生物因子的高表达有可能提示ESCC更容易出现淋巴结转移;肿瘤转移相关标志物CyclinD1和VEGF有可能是ESCC术后预后的独立因子,而CTGF未能显示是独立的预后因子。TNM分期后,再结合上述三个分子标志物,可进一步更好的判断ESCC的预后,TNMⅠ期的ESCC,如上述分子高表达,预后较差。TNMⅣ期低表达者也有可能有较好的预后,即上述转移相关的三个生物因子可以应用于ESCC的分子分型中。