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IL-2是主要由辅助性T淋巴细胞分泌的含有133个氨基酸残基的多肽。IL-2在免疫系统内发挥调节作用，尤其是作为生长因子调节淋巴细胞的生长和分化。IL-2可影响神经胶质细胞和神经元的存活，IL-2(5 nmol．L-1)使正常寡突胶质细胞和寡突胶质细胞瘤细胞系的增殖率升高2.5倍。IL-2对神经元也有营养作用，Awatsuji将胎鼠不同脑区的神经元进行体外培养，发现200U．mL-1的IL-2能够显著促进培养的海马神经元突起生长，延长神经元存活时间。本室以前的研究证实，IL-2参与调节大鼠垂体前叶细胞和垂体瘤细胞系的增殖活动，该调节活动受性激素等生理因素的影响。临床上用大剂量的重组IL-2对肿瘤进行免疫治疗，IL-2可 第四军医大学硕士学位论文以促进垂体组织块ACTH、Pgy和TSH的基础分泌，对LH、FSH和GH的分泌也有作用。 雌激素四)是由芳香化酶催化雄激素转化而来的，它影响靶组织的生长分化和功能发挥，外周雌激素主要由卵巢、睾丸产生，脑内主要由下丘脑、边缘系统的神经元和神经胶质细胞产生。雌激素受体（ER）属于类固醇受体超家族的核受体，具有a和日两种亚型，此二者在各种组织分布及密度各异。ER具核、膜双重分布特征。雌激素的作用通过经典的核受体通路和膜受体通路来完成。 HeLa宫颈癌细胞系在 1951年由 Gey从一 31岁黑人妇女宫颈癌建系成功，细胞形态为上皮样。宫颈癌发病率在全球妇女恶性肿瘤中仅次于乳腺癌，患病年龄跨度很大，见于 15－85岁，多发于45岁以上。近些年来，青年宫颈癌（（35岁）发病率有明显的上升趋势。BCapf7是我国第一株人体乳癌细胞系，1983年由北京医学院附属人民医院肿瘤研究室陈昌伟等建系成功。培养标本来自外科手术切除的人体乳癌原发瘤。细胞形态为多边形的上皮细胞形态，各时相的核分裂期及异常核分裂均可见到。细胞呈镶嵌样排列及重叠生长现象。BCap习7细胞来自女性病人，染色体为XX核型，具有ER阳性特征，G6PD同工酶检测为B型，细胞生长具有激素依赖性。 本研究探讨了IL－2上 和EZ的桔抗剂／协同剂TAM对原代培养大鼠子宫细胞、宫颈癌HeLa细胞系和乳腺癌Bcap上7细胞系增殖的影响并探讨其可能的作用机制。本实验采用的方法如下：1．大鼠子宫细胞原代培养；2．宫颈癌HeLa细胞系和乳腺癌Bcap上7细胞系传代培养； IHP＃WgZ 第 四军医大学硕士学位论文3．细胞记数绘制生长曲线：4．免疫细胞化学反应：检测ILZR的表达；5．RTPCR检测IL－ZdriRNA和ERInRNA的表达；6．DNA序列测定，鉴定HeLa细胞中ER 6的PCR产物是否为所 需序列：7．采用MTT法观察L上、EZ和TAM对细胞出90处OD值的影 响；8．采用流式细胞促检测IL－2I 和TAM对细胞周期各阶段DNA 含量的影响；9．运用激光扫描共聚焦技术观察IL－2、EZ和TAM对细胞内相对 Cd”浓度的影响。结果显示：1．IL－2（100 UaL）和 EZ（10”‘mol几）均可使宫颈癌 HeLa细胞 系和乳腺癌 Bcap37细胞系的生长曲线上移；而 TAM （1”‘ moUL）使宫颈癌HeLa细胞系的生长曲线上移，使乳腺癌 BCap刁7细胞系的生长曲线下移。2．宫颈癌 HeLa细胞系和乳腺癌 Bcapl7细胞系存在 IL2 a、e 和Y免疫反应阳性物质，均为胞浆着色。3．原代培养的大鼠子宫细胞和乳腺癌BC aPaP上7细胞系均表达 IL－ZR。、p、Y mRNA和 ER a、p mRNA，而宫颈癌 HeLa 细胞系表达L－ZR a、p、v InRNA和 ERp InRNA。4。DNA序列测定结果与Genbank进行比较，发现所得产物为ER p的某一段序列。5．10 U／mL、100 U／mL、1000 U／mL的 IL．2和 EZ（10－8～10“6 mol／L） 可以显著的促进大鼠子宫细胞、人宫颈癌HeLa细胞和乳腺癌 ＠3 第四军医大学硕士学位论文 Bcap－37细胞的增殖。TAM（（1‘8一IO”6 mol几）显著促进大鼠 子宫细胞和宫颈癌HeLa细胞增殖，并剂量依赖性的抑制人乳 腺癌BCap刁7细胞的增殖活动。6．IL－2（100 U／mL）和 EZ（10“6 mo讥）均可提高人宫颈癌 HeLa 细胞和乳腺癌BCapl7细胞S期的DNA含量，减少GI期的 DNA含量。TAM门一‘moffe）显著提高人宫颈癌 HeLa细胞 由 GI期进入 S期的比例，但相同剂量的 TAM显著的抑制乳腺 癌BCapl7细胞周期的进程，使BCap上7细胞凋亡，凋亡率达 到97．5％。7．EZ门“‘moffe）和 TAM门“‘mol几)可显著提高大鼠子宫细 胞、人宫颈癌HeLa细胞和乳腺癌BcapS7细胞内CaZ”荧光强 度。IL上门 U／mL)对人宫颈癌 HeLa细胞内 C／”荧光强度 无显著影响，但可明显降低乳腺癌s。p〕v细胞内caz”荧光强 度。 本研究表明，大鼠子宫细胞、人宫颈癌HeLa细胞和乳腺癌BCap3 7细胞都是 IL工、EZ和 TAM作用的重要靶位，IL上、EZ和TAM能直接调节三类细胞的生理功能。实验初步探讨了三者?