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一、用2-IT法修饰SZ-51制备99mTc标记血栓显像药盒 目的:研究99mTc标记抗P-选择素(P-Selectin)单克隆抗体SZ-51血栓显像药盒的制备方法。方法:用2-亚氨基噻吩盐酸盐(2-IT)修饰SZ-51,用99mTc-GH转换络合法标记IT-SZ-51,测定标记物的放化纯度及生物活性,以最佳标记条件制备血栓显像药盒。结果:以最佳比例修饰SZ-51,每分子抗体游离巯基数为13个,纸层析法测得标记率为90%以上,ELISA结果表明基本保留了抗体的免疫活性。制成的药盒4℃条件下可保存3个月以上。结论:该标记方法简便快速,为99mTc-IT-SZ-51用于血栓放射免疫显像奠定了基础。 二、99mTc-SZ-51对犬肺栓塞模型显像研究 目的:研究99mTc-SZ-51对犬肺栓塞模型的显像效果。方法:用2-亚氨基噻吩盐酸盐(2-IT)修饰SZ-51,99mTc-GH转换络合标记法标记IT-SZ-51后,对8只犬肺栓塞模型进行了放射免疫显像。结果:纸层析法测得标记率为90%以上,ELISA表明抗体保留了免疫活性。注入显像剂1小时后血栓部位开始显影并逐渐清晰,3小时后,在体显像及离体显像两者的放射性比值分别为5.3±0.5和7.0±1.2,形成1天的新鲜血栓的放射性摄取明显高于形成一周的血栓,离体组织测定两者比值达2.65。结论:99mTc-SZ-51能够特异地浓集于犬肺肺栓塞部位,对显示肺栓塞的形成及鉴别新鲜与陈旧血栓具有一定的应用价值。 三、99mTc-SZ51-F(ab)2的制备及犬肺栓塞显像研究 目的:应用99mTc标记抗人P-选择素(P-Selectin)单克隆抗体SZ51-F(ab)2进行犬肺栓塞模型显像,观察其在检测肺栓塞及鉴别新鲜和陈旧血栓中的作用。方法:用预激活木瓜蛋白酶法制备SZ51-F(ab)2,以2-亚氨基噻吩盐酸盐(2-IT)修饰后,采用99mTc-GH转换络合标记法制备99mTc-SZ51-F(ab)2。以快速薄层层析法、酶联免疫吸附法(ELISA)测定标记物的标记率及生物活性。对4只犬肺栓塞模型进行了放射免疫显像。结果:SZ51-F(ab)2的得率为46.7%,标记率为